彗星试验方法

主要仪器数显电热恒温水浴箱电泳仪电子分析天平荧光显微镜及数码成像系统匀浆器磁力搅拌器主要试剂氯化镉CdCl225H2O分析纯上海亭新化工试剂厂批号20080901使用时用去离子水配制成不同浓度正常熔点琼脂糖NMA低熔点琼脂糖LMAN十二烷基肌氨酸钠TritonX100溴化乙锭EB氯化钠氯化钾磷酸氢二钠Na2HPO412H2O磷酸二氢钾KH2PO4乙二胺四乙酸二钠Na2EDTA三羟甲基胺基甲烷Tris氢氧化钠NaOH二甲基亚砜DMSO盐酸HCl等均为国产分析纯试剂主要溶液的配制磷酸缓冲液PBSNaCl8gKCl02gNa2HPO412H2O29gKH2PO402g无Ca2Mg2双蒸水1000ml调pH至74冰箱4保存备用05正常熔点琼脂糖NMA05gNMA与100ml磷酸缓冲液混合加热溶解冷却后冰箱4保存备用05低熔点琼脂糖LMA05gLMA与100ml磷酸缓冲液混合加热溶解冷却后冰箱4保存备用细胞裂解液精确称取NaCl1461gNa2EDTA372gN十二烷基肌氨酸钠10gTris122g放入1000ml烧杯中加800ml双蒸水磁力搅拌溶解可加热以4molLNaOH调pH到100在容量