细胞生物学考试押题及参考答案(1)

一选择题15BABBB610BDABB1115ABCAC1618CCC二填空题1根据线粒体和叶绿体起源内共生学说认为线粒体起源于细菌叶绿体起源于蓝藻2协助扩散和主动运输的主要相同之处在于都需要载体速度都很快主要差别在于协助扩散只能顺浓度梯度进行不消耗能量主动运输可以逆浓度梯度进行消耗能量3核纤层结构的组成成分属于中间纤维蛋白家族4核小体的核心由四种组蛋白H2AH2BH3H4各两分子共8分子组成的八聚体核心的外面缠绕了175圈的DNA双螺旋其进出端结合有H1组蛋白分子5YAC酵母人工染色体的构建成功说明一个有功能的染色体至少有自主复制DNA序列着丝粒DNA序列端粒DNA序列三个不可缺少的功能元件6真核细胞和原核细胞中都存在的rRNA是5SrRNA7细胞周期调控中的两个主要因子细胞周期蛋白依赖的蛋白激酶CDK激酶和细胞周期蛋白其中前者是催化亚基后者相当于调节亚基三名词解释1常染色质euchromatin间期核中处于伸展状态压缩程度相对较低着色较浅的染色质2双信号系统以PIP2代谢为基础的信号通路中胞外刺激使转化为IP3和DAG引发IP3Ca2和DAGPKC两条信号转导途径在细胞内沿两个方向传递实现细胞对外界的应答这样的信号系统称之为双信号系统3细胞周期同步化将一个细胞群体内处于不同时期的细胞处于细胞周期的同一时相的方法4多聚核糖体具有特殊功能与形态结构的核糖体与mRNA的聚合体5细胞凋亡为维持内环境稳定由基因控制的细胞自主的有序的死亡6Hayflick界限正常的体外培养的细胞寿命不是无限的只能进行有限次数的增殖7踏车行为在一定条件下微丝的正极由于肌动蛋白亚基不断添加而延长负极由于肌动蛋白亚基去组装缩短这种现象称为踏车行为8细胞分化细胞选择性的表达各自特有的专一性蛋白质导致细胞在形态结构和功能上产生稳定性差异的过程9异染色质在细胞间期保持高度凝聚状态染色较深不具有转录活性的染色质有结构异染色质和兼性异染色质10常染色质常染色质是染色体中染色较浅的区段其染色质较为疏松11多聚核糖体当一个核糖体沿mRNA移动一定距离后另一个核糖体又与同一mRNA的SD序列结合而起始下一轮翻译使一个mRNA分子可能结合多个核糖体并带有长短不一的合成中的多肽链称为多聚核糖体httpbaikebaiducomview134349htmhttpbaikebaiducomview8563htm12程序性死亡为维持内环境稳定由基因控制的细胞自主的有序的死亡成为程序性死亡13MPF及其生化本质MPF是卵细胞促成熟因子可以诱导卵细胞成熟的一种活性物质本质是一种蛋白激酶含有Cdc2蛋白和周期蛋白三问答及实验分析题1怎么理解叶绿体与线粒体的半自主性答叶绿体和线粒体中除有DNA外还有RNA核糖体氨基酸活化酶等自我繁殖所必需的基本组分具有独立进行转录和翻译的功能但人们发现叶绿体仅能合成13种蛋白质线粒体能够合成的蛋白质也只有60多种而参与组成线粒体的绝大多数蛋白质仍得由核基因编码在细胞质核糖体上合成转移至叶绿体和线粒体内起作用这些蛋白质与叶绿体和线粒体DNA编码的蛋白质协同作用也就是说叶绿体和线粒体的自主程度是有限的它们对核遗传系统有很大的依赖性因此叶绿体和线粒体的生长和增值是受核基因组及其自身的基因两套遗传系统的控制这就称为叶绿体和线粒体的半自主性2什么是细胞周期同步化如何实现答细胞同步化可以通过人工诱导或人工选择即人为的或通过药物诱导使细胞同步化在细胞周期中某个特定时期目前应用较广泛的诱导同步化方法主要有两种即DNA合成阻断法和分裂中期阻断法1DNA阻断法是一种采用低毒或无毒的DNA合成抑制剂特异地抑制DNA合成而不影响处于其他时期的细胞进行细胞周期运转从而将被抑制的细胞抑制在DNA合成期的实验方法此方法的优点是同步化效率高几乎适合于所有体外培养的细胞体系这种方法目前被广泛应用2分裂中期阻断法某些药物如秋水仙素秋水酰胺和nocodazole等可以抑制微管聚合因而能有效地抑制细胞分裂器的形成将细胞阻断在细胞分裂中期处于间期的细胞受药物的影响相对较弱常可以继续运转到分裂期因而在药物持续存在的情况下处于分裂期的细胞数量会逐渐累加通过轻微振荡将变圆的分裂期细胞摇脱经过离心可以得到大量的分裂中期细胞将分裂中期细胞悬浮于新鲜培养液中继续培养它们可以继续分裂并沿细胞周期同步运转从而获得G1期不同阶段的细胞此方法的优点是操作简便效率高缺点是这些药物的毒性相对较大若处理的时间过长所得到的细胞常常不能恢复正常细胞周期运转3人工选择同步化人为的将不同时期的细胞分离开来从而获得不同时相的细胞群体3根据近年来的研究成果怎样理解RNA在生命起源与细胞起源中的地位答RNADNA蛋白质三种生物大分子只有RNA既具有信息载体功能又具有酶的催化功能因此推测可能是生命起源中最早的生物大分子在漫长的进化过程中由RNA催化产生了蛋白质DNA代替了RNA的遗传信息功能蛋白质取代了绝大部分RNA酶的功能逐渐演化成今天遗传信息流的模式中心法则2从化学上推测核糖核酸的基本成分是核糖很容易由当时地表丰富的甲烷合成而脱氧核糖需要还原形成这一反应由专一性的酶完成因此生命的早期形式可能是由膜围绕着一套具有自我复制能力的分子体系和简单物质与能量的供应体系其遗传物质载体是RNA不是DNA在遗传信息的表达中不仅要通过RNA完成转录翻译而且一些重要的反应需要RNA的催化作用4请论述真核细胞基因表达的多级调控系统答真核细胞基因表达的调控是多级调控系统主要发生在三个彼此相对独立的水平上转录前及转录水平调控决定某个基因是否会被转录并决定转录的频率转录前水平包括DNA重排DNA甲基化染色质丢失异染色质化等转录水平主要包括顺式作用元件和反式作用因子相互作用的综合调控加工水平的调控决定初始mRNA转录产物被加工为翻译成多肽的信使RNA的途径主要包括选择性剪接组成型剪切剪切增强子的识别加帽加PolyA尾巴等过程翻译水平的调控形成蛋白质一级结构决定某种mRNA是否会真正得到翻译如果能得到翻译还决定翻译的频率和时间长短包括mRNA的稳定性半寿期等翻译后水平调控多肽的折叠与修饰形成更高级的结构等5你将如何进一步研究该cDNA克隆的功能答根据以上信息推断这一cDNA克隆为一新基因可通过以下两个方面进一步研究其功能1构建含这一cDNA克隆的过表达载体将其在野生型受体细胞中表达分析转基因受体细胞的生理变化据此分析其功能2敲除野生型细胞中这一克隆的表达使野生型细胞中这一基因突变进而分析细胞的生理生化变化进一步分析该cDNA克隆的功能克隆鉴定定性测定454545寻找到相关克隆后对克隆片段的分析克隆DNA分析包括测序定性扩增和组构测定等克隆DNA测定之前必须先行分离纯化克隆DNA测定包括DNA大小酶切图谱插入片段的定位与定向测序等等核酸标记分子杂交454545从酶切片段中寻找目标DNA片段PCR克隆DNA的组构分析之前需确定功能基因的位置然后才能进行基因的组构分析克隆DNA酶解消化凝胶电泳转膜cDNA探针标记分子杂交报告基因启动子报告基因与载体连接并转化宿主细胞观察报告基因的表达研究启动子的功能与特性及下游基因的表达载体连接重组体DNA转化宿主细胞细胞培养细胞克隆克隆筛选分子杂交靶DNA克隆表达分析与功能分析6细胞程序性死亡的形态与生化特征形态特征1细胞表面的特化结构如绒毛消失细胞间接触消失但细胞膜依然完整未失去选择透过性线粒体大而完整核糖体逐渐与内质网脱离内质网囊腔膨胀逐渐与质膜融合细胞核内染色质固缩形成星月形帽状结构沿核膜分布2凋亡小体形成核染色质断裂为大小不等的片段与某些细胞器聚集在一起被反折的细胞质膜所包围细胞表面发泡产生泡状或芽庄突起随后分离形成单个凋亡小体3凋亡小体被邻近的细胞或吞噬细胞吞噬凋亡细胞的残余物质被重新利用此过程细胞膜始终完整DNA电泳检测凋亡小体细胞凋亡时细胞内特异性核酸内切酶活化染色质DNA在核小体间被特异切割DNA降解成180200bp或其整数倍片段因此凋亡细胞中提取的DNA在进行常规的电泳并染色大小不同的DNA可产生梯状条带7为什么中间丝有组织特异性怎样通过其鉴定肿瘤来源人类基因中至少有67钟不同的中间丝蛋白基因这种中间丝蛋白多样性与人体内200多种细胞类型相关这些细胞表现不同的功能和机械性又与其特殊的骨架成分有关因此中间丝蛋白是区别细胞类型的身份证在N端和C端序列差异为不同细胞类型提供了独特的环境不同来源的组织细胞表达不同类型的中间丝来源2在细胞分化中细胞内中间丝类型httpbaikebaiducomview714299htm随着细胞的分化过程而发生变化中间纤维具有组织特异性不同类型细胞含有不同IF蛋白质肿瘤细胞转移后仍保留源细胞的IF因此可用IF抗体来鉴定肿瘤的来源httpbaikebaiducomview442628htm第二信使能将细胞表面受体接受的细胞外信号转换为细胞内信号的物质称为第httpbaikebaiducomview77625htm二信使包括cAMPcGMPIP3Ca2DG一氧化氮等主动运输有直接供能耦联转运蛋白间接供能光驱动泵8如何验证细胞液中有MPF1融合实验将不同分裂期的细胞与间期细胞融合有些可以看到染色质凝聚称之为PCC超前凝聚染色体2胞质注射实验将分裂期的胞质注射到间期细胞引起间期细胞提前进入分裂期说明胞质中某种因子引起细胞成熟MPF是卵细胞促成熟因子3我们用基因敲除的方法敲掉CDK1的基因或者周期蛋白B的基因我们培养的细胞讲不会进入分裂期普通光学显微镜1光学放大系统2照明系统3机械和支架系统分辨率区分开两个质点的最小距离光镜最大分辨率02微米荧光显微技术光镜水平上检测细胞上的特异荧光染料在光源与样品间加入激发光滤片在物镜目镜见加入阻断滤片电子显微镜以波长小于01纳米的电子束作为光源分辨率为02纳米扫描电子显微镜用来观察样品表面形貌特征扫描隧道显微镜能观察到生物膜病毒等结构免疫荧光技术将抗原抗体特异性结合与荧光标记技术结合研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法二免疫电镜技术可以提高分辨率单克隆抗体技术骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合融合后的杂交瘤细胞一方面可以分泌抗体另一方面像肿瘤细胞可以无限增值线粒体起源于细菌叶绿体起源于蓝藻线粒体分裂方式收缩分离出芽间壁或隔膜分离知道分泌蛋白在粗面内置网上合成的决定因素是蛋白质N端的信号肽蛋白质分选两条途径翻译后转运途径共翻译转运途径边合成边转移到内质网微丝与那些运动相关肌肉收缩胞质环流阿米巴运动变皱膜运动吞噬膜蛋白定位微绒毛发生细胞膜的股价维持细胞形状细胞分裂的收缩环细胞伪足形成与迁移运动微管与哪些运动相关细胞结构的组织作用细胞内依赖微管的运输纤毛和鞭毛的运动纺锤体和染色体的运动G蛋白耦联受体介导的细胞信通路1以cAMP为第二信使激素G蛋白耦联受体G蛋白腺苷酸环化酶cAMPPKA基因调控蛋白基因转录病毒virus是由核酸分子DNA或RNA与蛋白质构成的非细胞形态的靠寄生生活的生物体分类以遗传物质分类DNA病毒RNA病毒蛋白质病毒如朊病毒按病毒结构分类真病毒Euvirus简称病毒和亚病毒包括类病毒朊病毒根据寄主类型分类噬菌体细菌病毒植物病毒如烟草花叶病毒动物病毒如禽流感病毒天花病毒HIV等从感染特性来分温和病毒如HIV烈性病毒如狂犬病毒病毒核酸分为4种其中单链RNA病毒可分为侵染性RNA病毒非侵染性RNA病毒以及带有反转录酶的的单链RNA病毒病毒有衣壳有的在衣壳外还有包膜核小体由组蛋白H2aH2bH3和H4各2分子构成核心组蛋白八聚体约200bp的DNA片段其中146bp绕八聚体175圈和一个H1组蛋白分子构成146bpDNA核小体核心2H2aH2bH3H4H155bpDNA核小体以核小体为基本单位经过进一步在螺旋和折叠形成更高级的结构直至形成染色体螺线体solenoid由核小体串珠左旋緾绕成螺线管状每圈包括6个核小体单位直径约30nm含有约100kbDNA的螺线体组成超螺旋的环状结构每个环的端口结合于染色体支架蛋白复合体上DNA分子与组蛋白所构成的若干超螺旋环沿蛋白质支架纵向分布并结合非组蛋白形成染色单体Southernblotting印迹克隆DNANorthernblotting印迹克隆RNA或cDNA