抗体标签

标签抗体简介httpbaikebaiducomview3858738htmhttpbaikebaiducomview116534htmhttpbaikebaiducomview20489htm标签抗体别名为抗原表位又称抗原决定簇是抗原分子中决定抗原特异性的特殊httpbaikebaiducomview9476htm区域或基团是与抗体特异性结合的结构或序列随着生物技术的发展科研人员可以通httpbaikebaiducomview97035htmhttpbaikebaiducomview141922htm过DNA重组技术构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化以达到研究的需求主要类别Flag抗体抗Flag标签抗体融合标签如FlagGST等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程控制蛋白质固定的空间取向及方便检测使体内生物事件可视化提高重组蛋白质的产量增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等常用的标签包括mycHAFlagHisGST等其中Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽DYKDDDDK融合到目标蛋白Flag标签可位于蛋白质的C端或N端该系统已广泛应用于各种细胞类型包括细菌酵母和哺乳动物细胞等相应的Flag标签抗体也被广泛应用由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的因此可以纯化所有有活性的融合蛋白Flag标签可以通过加入肠激酶处理去除肠激酶专一识别该肽序列C末端的5个氨基酸残基Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达细胞内定位以及纯化定性或定量检测Flag融合表达蛋白等His抗体抗His标签抗体httpbaikebaiducomview15472htm融合标签根据其相对分子质量大小可以分为两大类大的蛋白质分子和小的多肽片段融合标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程控制蛋白质固定的空间取向及方便检测使体内生物事件可视化提高重组蛋白质的产量增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等httpbaikebaiducomview720683htmHis标签是由6个组氨酸HisHisHisHisHisHis组成的短肽专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化由于分子量较小并且较容易分离和纯化His融合标签与其他标签相比有很多明显优势是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种利用His标签可以建立一个基于融合蛋白的高效检测和纯化系统His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达细胞内定位以及纯化定性或定量检测His融合表达蛋白等GST抗体抗GST标签抗体随着越来越多的新基因的发现基因融合蛋白表达体系以其在新发现蛋白研究中的显著优势已得到广泛应用其中GST标签体系具有蛋白表达产率高表达产物纯化方便以及利于GST抗体制备等特点GST融合蛋白在水溶液中可溶可从细菌裂解液中提取在不变性的条件下通过亲和层析得到GST融合蛋白可被位点特异性蛋白酶裂解从而除去GST蛋白融合蛋白又是一个非常好的强免疫原因此很容易制备抗新蛋白的抗体正是由于以上的优点商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用近年来在原核表达体系中谷胱甘肽S转移酶GST表达纯化系统的应用更为普遍用GST融合表达系统表达外源基因时对融合表达产物的检测和纯化非常重要这里面就包括了GST标签抗体的应用GFP抗体抗GFP标签抗体常用的标签包括GFPHAFlagHisGST等其中绿色萤光蛋白GreenFluorescentProtein简称GFP这种蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequoreavictoria的水母中发现其基因所产生的蛋白质在蓝色波长范围的光线激发下会发出绿色萤光GFP或其突变体EGFP等被广泛用于基因表达效率的检测以及和目的蛋白融合表达用于检测目的蛋白的表达和分布一般来说GFP抗体不仅可以检测GFP或其适当的突变体也可以检测和GFP或其适当的突变体融合表达蛋白的表达细胞内定位以及纯化定性或定量检测GFP融合表达蛋白等GFP标签可位于蛋白质的C端或N端该系统已广泛应用于各种细胞类型包括细菌酵母和哺乳动物细胞等相应的GFP标签抗体也被广泛应用Myc抗体抗Myc标签抗体随着蛋白质组学的迅猛发展重组蛋白质的使用在近年来大大增加重组杂合体含有一个亲和标签如GSTMycHis等可用于辅助目标蛋白的纯化这已经被广泛使用利用融合蛋白有助于重组蛋白纯化和检测的这个有点被广泛认可在1985年开发出鼠抗cmyc标签抗体并被作为免疫化学试剂用于细胞生物学和蛋白质工程领域中Myc标签序httpbaikebaiducomview79669htmhttpbaikebaiducomview1712193htmhttpbaikebaiducomview158693htm列为EQKLISEEDL已成功应用于WB杂交技术免疫沉淀IP和流式细胞术中因此可用于检测重组蛋白在细菌酵母昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况Myc重组蛋白质可通过偶联Myc标签抗体到二乙烯砜活化的琼脂糖上而进行亲和纯化Myc标签可放在C端或N端但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化HA抗体抗HA标签抗体融合标签如HAHis等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程控制蛋白质固定的空间取向及方便检测使体内生物事件可视化提高重组蛋白质的产量增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等常用的标签包括mycHAFlagHisGST等其中HA标签系统利用一个HAinfluenzahemagglutininepitopeYPYDVPDYA短肽肽融合到目标蛋白HA标签可位于蛋白质的C端或N端该系统已广泛应用于多种细胞类型相应的HA标签抗体也被广泛应用HA标签抗体能特异识别C末端或N末端带有HA标签HAtagged的融合蛋白