油橄榄不同品种叶片中总黄酮提取工艺的比较.docx

1油橄榄不同品种叶片中总黄酮提取工艺的比较朱静平西昌学院轻化工程学院四川西昌摘要以油橄榄叶片为原料以芦丁为对照品先通过单因素试验再采用正交试验优选总黄酮提取工艺确定分光光度法作为测定方法其选用作为显色剂在波长显色时间条件下对个油橄榄品种叶片中的总黄酮提取量进行测定比较结果表明最佳提取工艺为提取溶剂体积分数乙醇提取温度料液比回流时间不同品种油橄榄叶片中总黄酮的提取量并不相同在皮瓜尔科拉蒂莱星佛奥配多灵个品种中以科拉蒂的叶片总黄酮提取量最高莱星的含量最低通过比较不同品种油橄榄叶片中总黄酮提取量的高低为油橄榄叶片总黄酮的生产和应用提供了试验基础支撑也将为当地的油橄榄综合开发提供技术保障关键词油橄榄叶片总黄酮提取工艺提取量中图分类号文献标识码文章编号23收稿日期基金项目四川省教育厅科研项目作者简介朱静平女四川西昌人副教授硕士主要从事化学环境化学方面的研究电话电子信箱油橄榄又名洋橄榄齐敦果为木犀科木犀榄属常绿阔叶乔木其栽培种具有较高的食用价值可提炼优质食用植物油橄榄油自世纪年代起油橄榄开始在中国引种其中甘肃省陇南市武都区是目前全国最大的油橄榄种植基地现保存并培育有多个品种如佛奥莱星配多灵科拉蒂皮肖利戈达尔九峰号皮瓜尔阿斯格罗莎鄂植号中山号4城固号等在四川省境内从油橄榄的生存生态条件要求气候指标如气温降水空气湿度日照等方面来分析西昌地区是比较适宜油橄榄发展的区域当地已有近年油橄榄引种栽培的历史在油橄榄品种引进筛选方面做了大量的工作初步具备了采用优良品种进行生产栽培的基础条件但是油橄榄的果渣榨油废水和叶片等废弃物的利用还是空白综合利用还有待开发据报道油橄榄叶片中的活性成分主要是有机酸蛋白质氨基酸黄酮类物质等然而油橄榄品种繁多虽然不同的品种其叶片中所含的活性成分大致相同但活性成分的含量是否一致还未见报道因此有必要对不同品种油橄榄叶片进行活性成分的含量检测以期为油橄榄叶片的合理利用提供理论基础鉴于此试验采用单因素正交试验方法优选出最佳提取油橄榄叶片中总黄酮的工艺然后在最佳提取工艺条件下对个油橄榄品种叶片中的总黄酮进行了测定分析与比较现将结果报告如下材料与方法材料试剂有无水三氯化铝体积分数下同乙醇以芦丁为对照品都为国药集团化学试剂有限公司出品参试仪器主要有可见光分光光度计上海菁华科技仪器有限公司电子调温电热套天津市泰斯特有限公司循环水真空泵上海亚荣生化仪器厂数显恒温水浴5锅金坛市杰瑞尔电器有限公司微型高速粉碎机长沙市中南制药厂电子天平瑞士公司植物材料有油橄榄叶片由凉山州国家油橄榄良种基地提供品种为皮瓜尔科拉蒂莱星佛奥配多灵将采摘的各品种油橄榄叶片置于实验室内自然阴干干燥后的油橄榄叶片于微型高速粉碎机中粉碎然后放在干燥器皿中备用总黄酮的测定标准曲线的绘制用芦丁对照品制备芦丁标准溶液从芦丁标准溶液中分别精确移取置于容量瓶中都加乙醇至摇匀再分别加入的溶液用乙醇定容至刻度摇匀放置后在下测定溶液的吸光度值以浓度吸光度进行回归绘制标准曲线求得回归方程总黄酮测定对个品种油橄榄叶片按最佳提取工艺条件提取总黄酮后分别取各样品溶液置于容量瓶中加入乙醇至摇匀再分别加入的溶液用乙醇定容至刻度摇匀后放置于下测定吸光度值计算总黄酮的提取量单因素试验乙醇浓度对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响称取油橄榄叶片样品置于圆底烧瓶中分别用的乙醇为溶剂在提取温度为料液6比为的条件下水浴加热回流真空抽滤次常压蒸馏回收乙醇浓缩液用去离子水定容至静置沉降后取上清液用乙醇定容至即样品溶液取样品溶液按的方法测定样品溶液的吸光度值并计算总黄酮的提取量提取温度对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响称取油橄榄叶片样品用乙醇溶解料液比分别在的条件下水浴加热回流按的方法测定样品溶液的吸光度值并计算总黄酮的提取量料液比对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响称取油橄榄叶片样品用乙醇溶解分别在料液比为的条件下进行总黄酮提取温度都控制在水浴加热回流按的方法测定样品溶液的吸光度值并计算总黄酮的提取量回流时间对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响称取油橄榄叶片样品在乙醇料液比提取温度条件下分别回流再按的方法测定样品溶液的吸光度值并计算总黄酮的提取量正交试验在单因素试验的基础上以乙醇浓度提取温度料液比回流时间作为考察因素以测定的油橄榄叶片中总黄酮的提取量为考察指标采用正交试验方法对样品中的总黄酮进行提取以总黄酮7提取量为指标进行试验优化来确定最佳的提取工艺条件正交试验各因素水平设置见表结果与分析单因素试验结果标准曲线试验绘制的标准曲线见图以浓度吸光度进行回归所得到的线性回归方程为相关系数乙醇浓度对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响乙醇浓度对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响结果见图从图可以看出乙醇浓度较低时总黄酮提取量也较低说明对原料的提取不够完全而乙醇浓度太大时可能使一些脂溶性的杂质溶解增加从而影响了黄酮类化合物的溶出所以乙醇浓度为体积分数时油橄榄叶片中总黄酮的提取量最大因此选择的乙醇为提取溶剂提取温度对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响提取温度对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响结果见图从图可见油橄榄叶片总黄酮的提取量随提取温度的升高而逐渐增加在提取温度为时提取量最高以后又逐渐降低分析显示在的范围内随着温度升高分子运动加快溶质分子与溶剂分子能够充分接触可使黄酮类化合物更容易地溶解到溶剂中而超过后随着热效应的影响杂质的溶出量开始增加一些活性成分8也会被破坏所以综合考虑提取温度宜在左右料液比对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响料液比对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响结果见图从图可以看出随着料液比的减少总黄酮的提取量逐渐增高在时提取量最高而在提取量呈现降低趋势当料液比达到一定比例时黄酮类成分已基本溶出再减少料液比可能由于总黄酮被反应消耗了反而降低了总黄酮的提取效果同时随着溶剂量的增加回收试剂的能耗就越高不利于提高经济效应因此选择料液比为回流时间对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响回流时间对油橄榄叶片总黄酮提取量的影响结果见图由图可以看出随着回流时间的延长黄酮类化合物的提取量先上升后下降在内上升趋势明显达到最大值之后有下降趋势说明刚开始时由于时间较短黄酮类物质与溶剂还没充分反应溶出所以在时刚好达到溶出平衡使提取量最高而时间超过后溶剂的挥发导致乙醇浓度降低或者杂质溶解增加进而影响了黄酮类化合物的溶出使黄酮类化合物的提取量有所下降因此选择回流时间为正交试验结果正交试验提取油橄榄叶片总黄酮的比较结果见表从表9分析可知乙醇浓度提取温度料液比和回流时间这个因素对油橄榄叶片总黄酮提取量影响的主次顺序为乙醇浓度料液比提取温度回流时间根据正交试验得出的最佳提取条件为乙醇浓度提取温度料液比回流时间不同品种油橄榄叶片中的总黄酮提取量测定在乙醇浓度提取温度料液比回流时间的最佳提取条件下测定皮瓜尔科拉蒂莱星佛奥配多灵个油橄榄品种叶片的总黄酮含量结果见表从表可见以科拉蒂的叶片总黄酮含量最高莱星的含量最低加标回收试验称取油橄榄各品种叶片样品粉末用乙醇为溶剂然后在提取温度料液比的条件下水浴加热回流真空抽滤次常压蒸馏回收乙醇浓缩液用去离子水定容至静置沉降各取上清液用乙醇定容至每个品种分别精密量取上述溶液置于个容量瓶中加乙醇至摇匀再分别加入的溶液其中份各加入芦丁标准液用乙醇定容摇匀放置后于处测定吸光度值取均值计算出加标回收率结果见表从表可见个油橄榄品种叶片的加标回收率在表明这个结果较为可信所得到的叶片总黄酮含量也可观具有提取的价值10小结试验得出的油橄榄叶片中总黄酮最佳提取工艺为乙醇浓度体积分数提取温度料液比回流时间用此工艺对皮瓜尔科拉蒂莱星佛奥配多灵个油橄榄品种叶片中的总黄酮进行提取其分光光度法的显色剂为最大吸收波长在处最佳显色时间为结果表明不同油橄榄品种叶片的总黄酮提取量并不相同但差别不是很大其中科拉蒂的叶片总黄酮提取量最高其次分别为配多灵佛奥皮瓜尔莱星莱星的提取量最低加标回收率在表明这个结果较为可信方法也简单易操作能为西昌地区油橄榄叶片中总黄酮的提取及应用提供一定的试验基础支撑也将为当地的油橄榄综合开发提供技术保障参考文献白满英张金诚崔育京橄榄油的开发应用粮油食品科技马德华王友芳西昌地区油橄榄引种栽培的环境分析与评价四川林业科技朱静平油橄榄叶中活性成份初步分析湖北农业科学朱静平刘洪个品种油橄榄叶中活性成分分析江11苏农业科学许晖孔兰萍张斌等花生壳总黄酮乙醇提取工艺研究食品工业科技