1.1 DNA重组技术的基本工具
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【学习目标】
①简单描述基因工程的概念及目的。
②说出DNA重组技术的三个工具及各工具的特点和用途。
③利用DNA重组技术的工具解答有关题目。
【考纲要求】(1)基因工程的诞生Ⅰ (2)基因工程的原理及技术Ⅱ
【教学重点】DNA 重组技术所需要的三种基本工具的作用
【教学难点】基因工程载体需要具备的条件
【自主学习】
一、基因工程的概念
基因工程是指
二、DNA重组技术的基本工具
1.“分子手术刀”: (简称 )
2.“分子缝合针”:
3.“分子运输车”:
三、1、限制性核酸内切酶
(1)切割DNA的工具是 ,又称 。
来源:主要是从 中分离纯化出来的。
功能:能够识别双链DNA分子的某种 核苷酸序列,并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有 性。大多数限制酶的识别序列由 个核苷酸组成,例如: 、 限制酶。
(2)DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段,末端通常有两种形式,即 和 。前者是限制酶在它识别序列的 将DNA的两条链切开产生的是 ,后者是限制酶在它识别序列的 切开产生的是 。
2、DNA连接酶——“分子缝合针”
根据DNA连接酶的来源不同,可以将它分为两类:一类是从大肠杆菌中分离得到的,称为 DNA连接酶。另一类是从 分离出来的,称为 连接酶。
(1)相同点:都缝合 键。
(2)区别:E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的 之间连接起来,而不能将双链DNA片段
之间进行连接;而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的 ,又可以“缝合”双链DNA片段的 。但连接平末端的之间的效率较 。
3、基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”
(1)基因操作过程中使用载体两个作用:一是用它作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞中去;二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。
(2)基因工程中使用的载体有: 、 和 等。其中最常用的是 。质粒:是一种 的、 、 ,并具有 能力的 。有的细菌中有一个,有的细菌中有多个。
(3)作为载体必须具备以下条件:(要求背诵,课堂提问)
= 1 \* GB3 ①
= 2 \* GB3 ②
= 3 \* GB3 ③
【分析拓展】 DNA聚合酶是把单个的脱氧核苷酸连接成DNA片断;DNA连接酶