365文库
登录
注册
福利来袭，限时免费在线编辑
转Pdf
下载我编辑的
下载原始文档
收藏
曳屿境雰
上传于：2024-06-27
科技论文
大肠杆菌质粒DN A 提取方法的优化
作者
姓名：
班级;生命科学系 生物技术专业
学号:
2011．9.9
大肠杆菌质粒DNA提取方法的优化
摘要: 目的: 简化操作流程, 缩短提取时间, 降低试验对操作者的危害。方法: 该方法去除酚、氯仿等有害试剂, 采用Licl沉淀去除质粒制备物中小片段核酸( 包括DNA 和RNA) ; 工程菌生长至对数期时通过加入氯霉素后不仅方便质粒DNA 的提取过程中蛋白质的去除, 而且可使质粒的拷贝数进一步增加, 提高质粒DNA 产量的目的。结果: 实验改进方法所提取的质粒DNA 产量高于常规方法,达到20LgPmL。结论: 改进方法提取的质粒DNA, 其下游的内切酶消化, PCR、重组质粒鉴定、转化大肠杆菌等实验的结果和重复性都令人满意, 完全可用于一般的分子生物学研究。
关键词: 质粒; DNA 提取; 方法改进; 纯化
引言：大肠杆菌质粒DNA 的提取和检测在分子生物学中是常见的实验, 常规的碱裂解法提取质粒DNA 产物中常带有影响酶切等下游