病毒的分离方法

病毒的分离方法一般情况下分离病毒可以用传代细胞原代细胞或者直接用动物接种或者鸡胚接种只有在找不到适合病毒生长的原代细胞或者传代细胞的情况下才运用动物接种或者鸡胚接种的方法分离病毒大致过程应该是这样的第一获取病毒分离样品这个要求比较高采集后如果不能立即操作则必须低温保存并尽快送实验室操作另外也可以冷冻保存一般情况下病毒是不容易冻死的当然某些特殊病毒除外这需要查阅相关资料第二病毒分离操作将获取病样研磨并冻融至少一次当然研磨过程中必须低温同时研磨应充分在研磨时可以加入生理盐水或PBS或者直接加细胞培养液研磨完全后冻融一到三次冻融的目的是为了让细胞完全破裂将细胞内的病毒释放到溶液中然后低速离心取上清用022微米的滤膜过滤去过滤后的液体接种细胞此时须注意并不是所有病毒接种是都需要让细胞完全长满细胞瓶一般是不能产生细胞病的病毒最好在细胞长到40左右接种而能产生细胞病变的则需要完全长满细胞瓶以后再接种病毒接种过程中为避免污染可以加入双抗或者其他抗生素第三接种后观察某些能产生细胞病变的病毒很容易观察直接在显微镜下就能看是否分离成功如果病毒不产生细胞病变则需要用其他的方法来检测比如可用荧光抗体染色PCR