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上传于：2024-04-14
RNA质量控制
1. 相关概念
RNA质检参数OD260/OD280、OD260/OD230的意义。
260、280、320、230nm下的吸光度分别代表了核酸、蛋白质、盐浓度和有机溶剂的值。
A230: 测定其它碳源物质，如酚，糖类等。
A260：核酸的吸收峰测，测RNA，DNA，引物等的浓度用的。
A280：蛋白质的吸收峰。
一般的，我们只看OD260/OD280(Ratio，R)在1.8~2.1范围内时，我们认为 RNA中蛋白的污染是可以容忍的，不过要注意，当用 Tris 作为缓冲液检测吸光度时，R 值可能会大于 2（一般应该是<2.2的）。当R < 1.8时，溶液中蛋白的污染比较明显，可以根据自己的需要决定这份RNA 的命运。当R > 2.2时，说明RNA已经水解成单核酸了。纯RNA的OD260/OD280的比值为2.0。
2. RNA质量检验
RNA样品的品质检测一般分为总量，纯度与完整性三大项。
总量：微量分光光度计测260nm吸收值计算。
纯度：微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值，用于评估有机溶剂残留；260nm/280nm吸收值的比值，用于评估蛋白质污染