备考2023年高考生物一轮基础复习专题46 PCR技术.doc

119备考2023年高考生物一轮基础复习专题46PCR技术一单选题12022高二下南阳期中数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术其原理如图所示下列有关叙述错误的是A应根据目的基因的一段已知序列设计两种引物BPCR每一循环包括变性复性和延伸三个过程CPCR结束后有靶分子的反应单位能检测出荧光D每个反应单位中都需要加入解旋酶和耐高温DNA聚合酶答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A由于DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链因此要用两种引物才能确保DNA两条链同时被扩增A正确BPCR技术中的每个循环由变性退火复性延伸三个基本反应步骤构成B正确C荧光的出现是荧光探针水解导致的荧光探针将首先与模板DNA的相应区段结合靶分子随着DNA复制延伸至荧光探针部位导致荧光探针的水解进而产生荧光显然每个反应单位有无荧光取决于是否含有靶分子C正确DPCR技术通过高温解旋不需要解旋酶所以每个反应单位中都需要加入耐高温DNA聚合酶D错误故答案为D分析PCR扩增过程1变性当温度上升到90以上时双链DNA解聚为单链2复性当温度下降到50左右时两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合3延伸72左右时耐高温的DNA聚合酶活性高可使DNA新链由5端向3端延伸22022高二下阜宁期中如果已知一小段DNA的序列可采用PCR的方法简捷地分析出已知219序列两侧的序列已知的DNA序列为设计的一些PCR引物为5AACTATGCGCTCATGA35GCAATGCGTAGCCTCT35AGAGGCTACGCATTGC35TCATGAGCGCATAGTT3扩增过程选用的引物是A和B和C和D和答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3端开始延伸DNA子链因为DNA的合成方向总是从子链的5端向3端延伸故为扩增未知序列选择的与模板链相结合的引物应为5TCATGAGCGCATAGTT3引物和5GCAATGCGTAGCCTCT3引物C符合题意故答案为C分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开32022高三下湖北月考荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针当Taq酶催化子链延伸至探319针处会水解探针使荧光监测系统接收到荧光信号即每扩增一次就有一个荧光分子生成相关叙述错误的是A引物与探针均具特异性与模板结合时遵循碱基互补配对原则B反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关C若用cDNA作模板上述技术也可检测某基因的转录水平DTaq酶催化DNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A引物与探针均具特异性与模板结合时遵循碱基互补配对原则A正确B题干中提出每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针并且每扩增一次就有一个荧光分子生成因此反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关B正确C由于cDNA是以某基因转录形成的mRNA为模板逆转录形成的所以若用cDNA作模板上述技术也可检测某基因的转录水平C正确D由图可知Taq酶催化DNA的合成方向总是从子链的5端向3端延伸D错误故答案为D分析PCR扩增过程1变性当温度上升到90以上时双链DNA解聚为单链2复性当温度下降到50左右时两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合3延伸72左右时耐高温的DNA聚合酶活性高可使DNA新链由5端向3端延伸42022高三上营口期末dsRNA疫苗是一种新冠病毒疫苗其制备步骤为扩增新冠病毒靶向干扰基因构建重组质粒该载体导入大肠杆菌扩增并鉴定后将其与腺病毒载体共同转入特定动物细胞获得重组腺病毒疫苗该疫苗在人体细胞内合成dsRNA以干扰新冠病毒基因的表达下列说法错误的是419A构建重组质粒需用限制酶和DNA连接酶B该疫苗在人体细胞内合成dsRNA的过程需要消耗能量C该疫苗能诱导人体的特异性免疫发挥作用D可用PCR技术快速扩增靶向干扰基因答案C知识点PCR技术的基本操作和应用基因工程的操作程序详细免疫学的应用解析解答A构建重组质粒时用同一种限制酶切割目的基因和质粒再用DNA连接酶将目的基因和质粒拼接A正确BdsRNA疫苗本质是新冠病毒进入人体细胞后利用人体细胞的原料合成dsRNA此过程需要消耗能量B正确C该疫苗在人体细胞内合成dsRNA以干扰新冠病毒基因的表达并不能诱导人体的特异性免疫发挥作用C错误DPCR技术的原理是DNA复制可以在体外快速扩增靶向干扰基因D正确故答案为C分析1疫苗是将病原微生物如细菌立克次氏体病毒等及其代谢产物经过人工减毒灭活或利用基因工程等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂2基因工程技术的基本步骤1目的基因的获取方法有从基因文库中获取基因组文库包含某种生物所有的基因部分基因文库包含某种生物的部分基因如CDNA文库利用PCR技术扩增和人工合成2基因表达载体的构建基因表达载体的构建过程用同一种限制酶切割目的基因和运载体再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因a启动子在基因的首段它是RNA聚合酶的结合位点能控制着转录的开始b终止子在基因的尾端它控制着转录的结束c标记基因便于目的基因的鉴定和筛选3PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5195过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开52021湖北某实验利用PCR技术获取目的基因实验结果显示除目的基因条带引物与模板完全配对外还有2条非特异条带引物和模板不完全配对为了减少反应非特异条带的产生以下措施中有效的是A增加模板DNA的量B延长热变性的时间C延长延伸的时间D提高复性的温度答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答PCR过程中非特异性产物增加的原因是复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加故可通过提高复性的温度来减少反应非特异性条带的产生D正确ABC错误故答案为D分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开62021山东模拟新型冠状病毒的检测主要包含核酸检测抗体检测抗原检测等几种方法其中利用实时荧光RTPCR技术检测新型冠状病毒特异性核酸序列是最常用的方法RTPCR是将逆转录RTPCR以及荧光标记等相结合的技术下列说法错误的是A与抗体检测方法相比核酸检测能够检测到早期患者和无症状感染者B利用上述技术检测新型冠状病毒时PCR的模板实际上是逆转录得到的cDNAC利用上述技术检测新型冠状病毒时逆转录酶在每次循环中都能够发挥作用DRTPCR反应中需加入样品脱氧核苷酸耐高温的DNA聚合酶引物逆转录酶等答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A目前新型冠状病毒的检测方法主要集中在核酸和抗体检测上因抗体的产生需要一个免疫过程与抗体检测相比核酸检测的优点是早期诊断灵敏度和特异性高等故核酸检619测能够检测到早期患者和无症状感染者A正确B新冠病毒的遗传物质为RNA要先将病毒RNA逆转录再将得到的cDNA进行多聚酶链式反应扩增得到了大量DNA片段故PCR的模板实际上是逆转录得到的cDNAB正确C由于PCR反应体系加热至95时逆转录酶会变性失活因此逆转录酶不能在每次循环中都发挥作用C错误DRTPCR技术聚合酶链式反应是在实验室以少量样品制备大量DNA的一项生化技术反应系统中包括微量DNA样品耐高温的DNA聚合酶引物4种脱氧核苷酸逆转录酶等D正确故答案为C分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开72021山东我国考古学家利用现代人的DNA序列设计并合成了一种类似磁铁的引子成功将极其微量的古人类DNA从提取自土壤沉积物中的多种生物的DNA中识别并分离出来用于研究人类起源及进化下列说法正确的是A引子的彻底水解产物有两种B设计引子的DNA序列信息只能来自核DNAC设计引子前不需要知道古人类的DNA序列D土壤沉积物中的古人类双链DNA可直接与引子结合从而被识别答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A引子是DNA序列彻底水解产物为磷酸脱氧核糖和四种碱基共6种产物A错误B真核生物DNA主要存在细胞核中线粒体和叶绿体中也有B错误C引子是根据现代人DNA序列设计并合成C正确719D双链DNA分子解旋为单链才能与引子结合D错误故答案为C分析1PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2分析题意可知引子是一段单链DNA序列根据碱基互补配对的原则去探测古人类DNA中与该序列配对的碱基序列82021高三上普宁月考下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是A试管苗试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状B欲得到多个相同目的基因可采用PCR技术C同一植株的体细胞融合后形成的新个体与原植物可能属于不同物种D动物细胞培养过程中CO2的主要作用是维持培养液的pH答案A知识点PCR技术的基本操作和应用植物体细胞杂交的过程及应用动物细胞培养技术解析解答A试管牛是体外受精获得属于无性生殖A错误BPCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术B正确C将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞杂种细胞培育成杂种植株不同种的植物之间具有生殖隔离不属于同一物种C正确D动物细胞培养过程中CO2的作用是维持培养液的pHD正确故答案为A分析1PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延819伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2动物细胞培养条件1无菌无毒的环境消毒灭菌添加一定量的抗生素定期更换培养液以清除代谢废物2营养物质糖氨基酸促生长因子无机盐微量元素等还需加入血清血浆等天然物质3温度和pH4气体环境95空气细胞代谢必需的和5的CO2维持培养液的pH3植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性进行植物体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁进行植物原生质体的融合形成杂种细胞再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株不同种的植物之间具有生殖隔离该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离克服了远缘杂交不亲和的障碍92021如皋模拟PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术与人体细胞内DNA分子复制相比下列有关叙述错误的是A都遵循碱基互补配对原则BDNA聚合酶作用的最适温度不同C都是边解旋边复制的过程D复制方式都是半保留复制答案C知识点PCR技术的基本操作和应用DNA分子的复制解析解答ADNA分子的体外复制和体内复制都遵循碱基互补配对原则A正确BPCR技术是在较高温度条件下进行的因此PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高B正确CPCR技术是在较高温度条件下打开双链后进行扩增的不是边解旋边复制的C错误DDNA复制方式都是半保留复制D正确故答案为C分析1有关DNA分子的复制1场所主要在细胞核此外在线粒体和叶绿体中也能进行2时期有丝分裂间期和减数第一次分裂间期3特点边解旋边复制复制方式为半保留复制4条件模板亲代DNA分子的两条链原料游离的4种脱氧核苷酸能量ATP酶解旋酶DNA聚合酶4原则碱基互补配对原则ATGCCGTA2PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过919程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开102021高二下阳江期末PCR是一种体外扩增DNA的技术模拟了体内的DNA复制过程下图是PCR技术原理示意图下列相关叙述错误的是A物质a是游离的4种脱氧核苷酸B过程中94高温的作用相当于解旋酶的作用C新合成的子代DNA会恢复双螺旋结构D过程体现了DNA边解旋边复制的特点答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A分析题图可知物质a是原料即游离的四种脱氧核苷酸A正确B根据PCR的反应原理可知高温使DNA变性氢键可自动解开解旋酶作用于氢键因此过程中94高温的作用相当于解旋酶的作用B正确C由题图中温延伸合成子链过程可知新合成的子代DNA恢复双螺旋结构C正确D过程DNA分子氢键全部打开过程以其中每一条DNA链为模板合成子链因此无法体现DNA边解旋边复制的特点D错误故答案为D分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开112021武汉模拟丙型肝炎病毒HCV为单链RNA复制病毒其RNA可直接作为信使通过宿主细胞合成蛋白质下列叙述错误的是1019AHCV的RNA复制时需先合成其互补链BHCV的RNA复制所需的酶是在宿主细胞中合成的C抑制RNA复制所需酶的活性可阻断HCV的增殖DPCR技术直接扩增RNA可用于HCV感染的早期诊断答案D知识点中心法则及其发展PCR技术的基本操作和应用解析解答AHCV的单链RNA复制时需先合成其互补链然后根据其互补链为模板合成遗传物质RNAA正确BHCV的RNA复制所需的酶是在宿主细胞中的核糖体上合成的B正确C丙型肝炎病毒HCV为单链RNA复制病毒抑制RNA复制所需酶的活性可阻断HCV的RNA复制进而抑制该病毒的增殖C正确DPCR技术不能直接扩增RNA需要先逆转录形成DNA然后在引物作用下合成子代DNAD错误故答案为D分析中心法则1遗传信息可以从DNA流向DNA即DNA的复制2遗传信息可以从DNA流向RNA进而流向蛋白质即遗传信息的转录和翻译后来中心法则又补充了遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA两条途径122021高二下吉林期中PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术下列有关该技术的叙述不正确的是APCR技术的原理是DNA复制B变性过程中利用高温使DNA双链解开C复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的D延伸过程需要Taq酶ATP四种核糖核苷酸答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答PCR技术包括变性复性和延伸三个步骤PCR技术的原理是DNA复制A项正确变性过程是利用高温9095使DNA双链解开B项正确复性过程是将变性后形成的单链DNA分子模板冷却到5560后使引物与DNA模板链通过碱基互补配对的方式结合C项正确延伸过程是在7075下Taq酶从引物起始进行互补链的合成该过程需要Taq酶四种脱氧1119核苷酸D项错误分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提条件要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开132021高二下福州期中下列关于PCR技术的叙述错误的是APCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术B根据目的基因全部的核苷酸序列设计引物C设计引物时需要避免引物之间碱基互补配对D退火温度过高会破坏引物与模板的碱基互补配对答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答APCR是一项利用DNA复制原理在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术A正确B利用PCR技术扩增目的基因时设计引物序列的主要依据是目的基因两端的部分核苷酸序列而不必知道据目的基因全部的核苷酸序列B错误CPCR过程中需要两种引物分子不同引物能靠碱基互补配对而形成部分双链的话会造成引物不能同模板DNA结合也就不能发生进一步的链式反应这一点需要避免C正确DPCR扩增时退火温度的设定是成败的关键退火温度过高会破坏引物与模板之间的碱基配对导致引物与模板不能相连D正确故答案为B分析PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术原理DNA复制条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚合酶Taq酶过程高温变性低温复性中温延伸142021高三下辽宁开学考PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术下列有关PCR过程的叙述正确的是A待扩增的DNA两条链的解旋过程需要酶的催化1219B所用引物的长度越短与模板链结合的特异性越强C在子链的形成过程中dNTP可以提供原料和能量D与细胞内DNA复制相比PCR所需要的酶对高温比较敏感答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答APCR扩增DNA时DNA解旋过程是通过高温来实现的A错误B引物越长能够配对的概率越低与模板链结合的特异性越强B错误CdNTP包括dATPdGTPdCTP和dTTP在子链的形成过程中可以提供原料和能量C正确DPCR所需要的酶为热稳定性DNA聚合酶其最适温度较高D错误故答案为C分析PCR扩增过程1变性当温度上升到90以上时双链DNA解聚为单链2复性当温度下降到50左右时两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合3延伸72左右时耐高温的DNA聚合酶活性高可使DNA新链由5端向3端延伸152021高二下湖北月考PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术下列说法不正确的是APCR需要在一定的缓冲溶液中才能进行BPCR所用的解旋酶和DNA聚合酶都具有耐高温的特性CPCR一般要经历三十多次循环每次循环可以分为变性复性和延伸三步D若以某一DNA片段作为模板5次循环后理论上反应物中应有32个这样的DNA片段答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答APCR需要在一定的缓冲溶液中才能进行加入缓冲液主要是为酶提供需要的相关Ca2以及其他辅助因子以模仿其最适的扩增条件A正确BPCR技术中通过高温解旋不需要采用解旋酶B错误CPCR一般要经历三十多次循环每次循环可以分为变性复性和延伸三步C正确D若以某一DNA片段作为模板5次循环后理论上反应物中应有2532个这样的DNA片段D正确1319故答案为B分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提条件要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开162021高二下湖北月考下列关于生物技术实践的叙述中正确的是A酵母菌的繁殖能力很强果酒制作时不需对装置进行消毒处理B果酒制成后只需将装置转移到温度较高的环境中即可制作果醋CPCR术中引物I和引物的碱基序列不能互补D果酒果醋腐乳的制作中有机物的分解都在微生物的细胞内答案C知识点果酒果醋的制作腐乳的制作PCR技术的基本操作和应用解析解答A果酒制作过程中为了防止杂菌污染需要对所用的装置进行消毒处理A错误B醋酸菌属于好氧菌且发酵所需温度更高因此果酒制成后需要将装置转移到温度较高的环境中并且需要通入无菌空气才可制作果醋B错误CPCR技术扩增目的基因时所用两种引物的碱基序列不能互补否则引物之间互相结合就不会与模板链结合了C正确D果酒果醋的制作中有机物的分解都在微生物的细胞内进行但腐乳的制作中有机物的分解是在微生物的细胞外进行D错误故答案为C分析果酒制作菌种是酵母菌代谢类型是兼性厌氧型真菌属于真核细胞条件是1825前期需氧后期不需氧果醋制作的菌种是醋酸菌代谢类型是需氧型细菌属于原核细胞条件是3035一直需氧腐乳的制作原理参与豆魔发酵的微生物有青霉酵母曲霉毛霉等多种其中起主要作用的是毛霾其代谢类型为异荠需氧型适宜温度为1518毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸甘油和脂肪1419PCR技术扩增目的基因时所用两种引物的碱基序列互补则引物之间互相结合不能结合模板链使得新链不能合成不能完成DNA扩增172021高二下湖北月考PCR反应过程中引物的作用是A打开DNA双链便于复制进行B提供3端羟基作为DNA合成的起点C催化合成DNA子链以形成新的双螺旋D提供5端羟基作为DNA合成的起点答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答PCR技术的原理是DNA复制而DNA的复制需要引物其主要原因是DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链因此引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3端开始复制即B正确ACD错误故答案为B分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提条件要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开182021高二下榆林月考下列有关PCR技术的说法不正确的是APCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术BPCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNACPCR技术的原理是DNA双链复制D利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答APCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术A正确BPCR技术中通过高温解旋不需要解旋酶B错误CPCR技术的原理是DNA双链复制C正确1519D利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列D正确故答案为B分析PCR扩增技术中文名称为聚合酶链式反应关于PCR技术扩增目的基因简介1原理DNA双链可以进行半保留复制2过程第一步加热至9095DNA解链第二步冷却到5560引物结合到互补DNA链第三步加热至7075热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成3条件模板引物热稳定DNA聚合酶taqDNA聚合酶4特点使微量的DNA大幅增多二综合题192022全国乙卷新冠疫情出现后病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用回答下列问题1新冠病毒是一种RNA病毒检测新冠病毒RNA核酸检测可以采取RTPCR法这种方法的基本原理是先以病毒RNA为模板合成cDNA这一过程需要的酶是再通过PCR技术扩增相应的DNA片段根据检测结果判断被检测者是否感染新冠病毒2为了确保新冠病毒核酸检测的准确性在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的来进行PCR过程每次循环分为3步其中温度最低的一步是3某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测检测体内是否有新冠病毒抗体若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性说明答出1种情况即可若核酸检测和抗体检测结果均为阳性说明4常见的病毒疫苗有灭活疫苗蛋白疫苗和重组疫苗等已知某种病毒的特异性蛋白S具有抗原性的编码序列目的基因为了制备蛋白疫苗可以通过基因工程技术获得大量蛋白S基因工程的基本操作流程是答案1逆转录酶或反转录酶2特异性核苷酸序列退火或复性3曾感染新冠病毒已康复已感染新冠病毒是患者4获取S蛋白基因构建S蛋白基因与运载体的表达载体导入受体细胞目的基因的检测与鉴定检测受体能否产生S蛋白1619知识点PCR技术的基本操作和应用基因工程的操作程序详细解析解答1以病毒RNA为模板合成cDNA的过程是逆转录过程需要逆转录酶的参与故答案为逆转录酶或反转录酶2引物需要有一段已知目的基因的核苷酸序列来合成核苷酸的特异性越高引物的准确性越高PCR过程中需要高温变性DNA解旋过程低温复性也可称为退火引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链故答案为特异性核苷酸序列退火或复性3新冠病毒的检测包括核酸检测和抗体检测核酸检测为阳性则说明体内含有新冠病毒阴性说明体内不含有新冠病毒抗体检测阴性说明体内不含新冠病毒抗体阳性说明体内含有新冠病毒抗体若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性说明曾感染新冠病毒已康复若核酸检测和抗体检测结果均为阳性说明已感染新冠病毒是患者故答案为曾感染新冠病毒已康复已感染新冠病毒是患者4通过基因工程技术获得蛋白S基因工程的基本操作流程为目的基因的获取获取S蛋白基因基因表达载体的构建构建S蛋白基因与运载体的表达载体将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定检测受体能否产生S蛋白故答案为获取S蛋白基因构建S蛋白基因与运载体的表达载体导入受体细胞目的基因的检测与鉴定检测受体能否产生S蛋白分析1核酸检测的原理新冠病毒需要在宿主细胞中进行增殖所需要的原料和能量来自于人体宿主细胞该病毒的基因组是指病毒体内以核苷酸序列形式存储的遗传信息以新型冠状病毒的RNA分子为模板经逆反转录过程形成DNA用核酸检测试剂盒检测灵敏度较高的原因是逆转录过程遵循碱基互补配对的原则具有很强的专一性2PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开3基因工程技术的基本步骤1目的基因的获取方法有从基因文库中获取基因组文库包含某种生物所有的基因部分基1719因文库包含某种生物的部分基因如CDNA文库利用PCR技术扩增和人工合成2基因表达载体的构建基因表达载体的构建过程用同一种限制酶切割目的基因和运载体再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因a启动子在基因的首段它是RNA聚合酶的结合位点能控制着转录的开始b终止子在基因的尾端它控制着转录的结束c标记基因便于目的基因的鉴定和筛选3将目的基因导入受体细胞根据受体细胞不同导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法基因枪法和花粉管通道法将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法Ca2处理法4目的基因的检测与鉴定分子水平上的检测检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因45DNA分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA45分子杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质45抗原抗体杂交技术个体水平上的鉴定抗虫鉴定抗病鉴定活性鉴定等202022高三下广南月考金属硫蛋白MT是一类广泛存在的金属结合蛋白某研究小组计划通过多聚酶链式反应PCR扩增获得目的基因构建转基因工程菌用于重金属废水的净化处理PCR扩增过程示意图如下请回答下列问题1从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA通过获得用于PCR扩增2设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物引物1和引物2为方便构建重组质粒在引物中需要增加适当的位点设计引物时需要避免引物之间形成而造成引物自连3图中步骤1代表步骤2代表退火步骤3代表延伸这三个步骤组成一轮循1819环4PCR扩增时退火温度的设定是成败的关键退火温度过高会破坏的碱基配对退火温度的设定与引物长度碱基组成有关长度相同但的引物需要设定更高的退火温度5如果PCR反应得不到任何扩增产物则可以采取的改进措施有填序号升高退火温度降低退火温度重新设计引物答案1逆转录cDNA2限制性核酸内切酶碱基互补配对3变性4引物与模板GC含量高5知识点PCR技术的基本操作和应用基因工程的操作程序详细解析解答1PCR扩增目的基因首先要有目的基因作为模板所以从高表达MT蛋白的生物组织中提取mRNA通过逆转录获得cDNA从而用于PCR扩增2构建重组质粒首先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和质粒所以位于目的基因两端的引物中需要增加适量的限制酶位点设计的引物之间不能有碱基互补配对否则引物自连不能与模板相连3图中步骤123分别表示变性退火延伸这三个步骤组成一轮循环4退火表示引物与模板链相连若温度过高会破坏引物与模板的碱基配对由于GC间三个氢键AT间两个键所以GC含量越高的引物退火温度越高5PCR反应得不到任何扩增产物可能是退火温度过高导致引物与模板不能相连或引物间相互配对引物自连不能与模板相连可通过降低退火温度或重新设计引物进行改进分析1PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2基因表达载体的构建1过程用同一种限制酶切割目的基因和运载体再用DNA连接酶将1919目的基因和运载体连接形成重组DNA分子2目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用3基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因启动子在基因的首段它是RNA聚合酶的结合位点能控制着转录的开始终止子在基因的尾端它控制着转录的结束标记基因便于目的基因的鉴定和筛选