细胞基质的质量控制

细胞基质的质量控制 发布日其 栏目 标题 作者 大多数现行疫苗是通过组织培养的方法制备的，所谓组织增养是体外 培养一定量的动物细胞并接种病毒，利用病毒在细胞内增殖，得到预期的 病毒抗原，然后制成疫苗。 众所周知，商苗的质量控制是全面的质量控制，包括原材料、生产过 程、半成品、成品，细胞基质是疫苗生产的主要原材料，其质量控制直接 影响终产品的安全性。本文简要介绍 WHO 对细胞基质质量控制的要求。 一、细胞基质的种类 工原代细胞: 动物组织经胰栈消化雯养成单层细胞, 用于病毒的堵养。 如地鼠凤细胞、沙鼠细胞、猴肾细胞、免骨细胞、鸡凸细胞等。在疫昔 的生产中使用了 40 多年，证明是安全有效的。 优点，1) 相对简单，2》 具有广泛的和感性。 缺点。1) 有较严重的潜在的病毒污染问题，动物的级别很难达到 SpF 级， 2) 来自不同动物的质量和敏感性有差异，3》 动物来源越来越困难， 尤其是灵长目动物。 2 .二倍体细胞，具有一定的传代寿命，超过一定代次，细胞衰老。如  2BS 细胞、MRC-5 细胞等。在疫苗的生产中使用了 30 多年，证明是安全有 效的。 优点: 1) 能够充分鉴定和标准化: 2) 使用种子库系统生产。 缺点: 1)》 不易大规模生产，尤其是不能微载体生物反应器。2) 对培 养基及牛血清的要求较高。 3.传代细胞:理论上具有无限传代的寿命。如 Vero 细胞、BHK21 细胞 等。 优点: 1) 能够充分鉴定和标准化; 2) 使用种子库系统生产。 3) 可大规模生产，可用于微载体生物反应器。4) 对培养基及牛血清 的要求不高。 缺点: 理论上有致肿瘤性的危险。 但已证明 vero 细胞在 134~150 范围 内使用，无致肿瘤性。 二、动物细胞的潜在危险 1病毒污染: 1) 人类或灵长目动物细胞可能携带潜在病毒，如乙型肝炎病毒、道 转录病毒等。 2) 禽类组织细胞隐藏着外源和内源性逆转录病毒， 3) 叶齿类细胞隐藏着外源和内源性逆转录病毒， 2.细胞 DNA 1原代细胞和二倍体细胞的残余 DNA 无危险性。 1传代细胞系的 DNA 具有是其他细胞生长失控和产生致肿瘤活性的潜 在能力。并认为<10ng/剂量是安全的。 3.促生长蛋白  生产细胞可分泌生长因子，认为不构成严重危险。但使用传代细胞生 产的疫苗，应进行纯化，去除细胞蛋白。 三、WHO 的有关要求 《一) 对所有生产细胞的要求 1.GMP 1) 规范的操作; 2) 原材料的选择，细胞的供体应无传染病或病因不能确定的疾病。 2.细胞堵养中的有关检测 1) 牛血清: 无细菌、真菌、支原体和感染性病毒。有些国家还要进 行无噬菌体的检测; 有些国家使用辐射的方法灭活潜在污染的病毒.用 TSE 非疫区的牛血清。 2) 胰酶;无细菌、真菌、支原体和感染性病毒，特别进行牛或猪细 小病毒的检测，有些国家使用辐射的方法灭活潜在污染的病毒。 3) 生产结束时的检测:无细菌、真菌、支原体。 4) 生产结束时检测外源性病毒 《1) 25%的对照细胞《不接种病毒) 无病变; 2) 豚鼠红细胞血吸附 法检 测阴性; 3》 转种人二倍体细胞、本细胞系的其他批次、其他种属的 细胞系无病变并血吸附阴性。 二) 对传代细胞的要求 工建立主代细胞库、工作细胞库 对于主代细胞库须进行一次全面的外源因子检定，检测可能存在的内  源性和外源性外源因子，特别注意已知以潜伏状态存在于来源物种中的因 子。主代种子库检定合格后，工作种子库和生产细胞只进行一般的外源因 子检查。 1无菌试验〔细菌、霉菌、支原体) 1细胞法检测病