毕业设计论文正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺系别生物与食品工程系专业班级生物工程级班作者学号指导教师完成日期年月日蚌埠学院教务处制目录中文摘要英文摘要引言课题的作用和意义国内外的研究现状和发展趋势多糖生物活性的研究现状多糖提取方法的研究现状多糖研究的发展趋势石榴皮生物活性的研究现状和发展趋势抗氧化活性抗菌活性抗病毒活性抗肿瘤活性免疫调节活性发展趋势尚待研究的问题材料与方法材料与试剂仪器与设备试验方法工艺流程实验方法多糖得率单因素实验正交试验统计分析结果与分析水浸处理单因素实验水浸提温度对石榴皮多糖提取效果的影响水浸时间对石榴皮多糖提取效果的影响料液比对石榴皮提取效果的影响乙醇浓度对石榴皮多糖提取效果的的影响正交试验结果统计分析结果结论谢辞参考文献蚌埠学院毕业论文设计论文正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺摘要采用水浸乙醇沉淀法从怀远石榴皮中提取多糖通过单因素实验和正交试验确定石榴皮多糖的最适提取条件为料液比为提取温度为时间为乙醇浓度多糖的得率为本研究为石榴皮多糖的综合利用提供理论依据关键词石榴皮多糖提取正交实验王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺蚌埠学院毕业论文设计论文正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺引言多糖广泛分布于自然界的多种生物体中尤其是动物细胞膜植物细胞壁和微生物细胞壁中是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物是构成生命体的分子基础之一多糖是生物体内一类重要的大分子除了储存能量和支持结构外还是一类重要的信息分子在生物体内起着信息传递的功能近年来人们发现一些多糖如香菇多糖云芝多糖茯苓多糖能够治疗免疫系统受到损伤而引发的一些疾病无毒副作用是一类有很大开发潜力的免疫调节剂特别是多糖的一些衍生物如硫酸酯化多糖具有抗肿瘤和抗病毒的活性为此多糖在医药方面的应用渐渐引起人们的兴趣迄今为止已有多种多糖类化合物从天然产物中分离出来其中从植物中提取的水溶性多糖最为重要因为它药理活性强来源广泛细胞毒性低安全性强毒副作用较小已引起医药界的广泛关注并成为当今生命科学研究的热点之一课题的作用和意义多糖是一类广泛存在于动植物体内和微生物细胞壁中由多个单糖分子聚合而成的天然高分子化合物是维持生命活动正常运转的基本物质之一近来研究发现多糖具有增强机体免疫力抗肿瘤降血糖降血脂抗病毒抗衰老抗炎症等多方面的生物活性石榴皮中含有丰富的黄酮类化合物酚类化合物多糖等多种功能成分有研究报道石榴皮具有抗氧化抗病毒抗菌抗肿瘤免疫调节等药理学作用近年来国内外对石榴皮的研究仍渐深入石榴在我国主要有大石榴产地即陕西临潼山东枣庄安徽怀远四川会理云南蒙自和会泽新疆叶城关于怀远石榴皮多糖的研究还未有报道本研究探索怀远石榴皮多糖的提取条件为怀远石榴皮多糖的开发提供理论依据国内外的研究现状和发展趋势多糖的生物活性研究现状抗肿瘤作用自从年发现酵母多糖具有抗肿瘤效应以来已分离出很多王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺具有抗肿瘤活性的植物多糖就多糖的抗肿瘤作用而言可将抗肿瘤多糖分为类一类是具有细胞毒性的多糖直接杀死肿瘤细胞如牛膝多糖可提高活性诱生抑制实体瘤第二类是作为生物免疫反应调节剂通过增强机体的免疫功能而间接抑制或杀死肿瘤细胞如商陆多糖能增强活性增强免疫抑制小鼠肉瘤其抗肿瘤机制主要是通过多糖的免疫调节作用激活免疫细胞诱导多种细胞因子和细胞因子受体基因的表达增强机体抗肿瘤免疫功能从而间接抑制或杀死肿瘤细胞一些具有细胞毒性的水果多糖还可以直接杀死肿瘤细胞已证明黄芪多糖是通过免疫功能而起作用可以提高血浆中环磷酸腺苷水平使环磷酸腺苷环磷酸鸟苷保持稳定从而防止变异细胞的无节制增殖起到预防肿瘤继续扩散转移的作用抗病毒作用多糖可通过类似的免疫调节机制增强宿主的免疫功能以抵抗病原体的侵袭许多研究证明多糖对多种病毒如单纯孢疹病毒巨细胞病毒流感病毒囊状胃炎病毒劳斯肉瘤病毒反转录病毒和鸟肉瘤病毒等有抑制作用大量研究表明许多植物多糖对各种病毒有抑制作用如艾滋病病毒单纯疱疹病毒等目前多糖衍生物尤其是硫酸脂多糖是当今多糖研究中个热点研究发现它具有显著抗病毒作用尤其是对艾滋病毒抑制作用有研究表明红藻中分离硫酸半乳聚糖能在体外抑制和引起细胞病变同时抑制合胞体形成另外还可抑制如疱疹病毒砂粒病毒等其它病毒此外板兰根多糖硫酸葡聚糖硫酸香菇多糖等也具有抗病毒作用由于病毒的感染是肿瘤的发病机制之一因此多糖的抗病毒效果也是可能的远期的抗肿瘤效果的机制之一免疫调节作用多糖是一种免疫调节剂能刺激各种免疫活性细胞成熟分化和繁殖主要通过诱生多种细胞因子促进干扰素白细胞介素等的产生激活巨噬细胞自然杀伤细胞细胞和淋巴细胞等免疫细胞及网状内皮系统和补体系统促进抗体产生等多途径多层面来提高机体特异性和非特异性免疫功能从而发挥其对免疫功能的多方面调节作用等研究了仙人掌多糖对巨噬细胞的调节功能能够激活核因子作者建议可作为辅助免疫调节剂大量的研究已初步证实从中药中分离得到的一些多糖如芦荟多糖除虫菊多糖红豆蔻多糖苦西瓜多糖等具有显著的免疫增强作用黄芪多糖能纠正小鼠型细胞细胞因子的免疫失衡状态从而可预防型糖尿病的发生香菇多糖是理想的免疫促进剂它作为细胞定位的佐剂和辅助细蚌埠学院毕业论文设计论文胞刺激参与机体免疫反应具有高度特异性的免疫增强作用抗氧化作用近几年的研究表明过多的活性氧自由基对吞噬细胞本身及其他细胞组织及生物大分子有破坏作用而脂质过氧化加速又可造成正常细胞的破坏和死亡现代医学认为包括癌症心脑血管疾病过敏免疫系统低下等多种疾病的发生以及人体衰老等过程都与体内抗氧化水平和自由基代谢失调有关因此各种抗氧化剂和自由基清除剂在人类健康方面具有重要的作用红枣多糖抗氧化动物实验表明红枣多糖能提高小鼠血液肝脏及脑组织中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性降低小鼠血液肝脏及脑组织丙二醛含量说明红枣多糖在体内具有抗氧化作用余甘多糖能显著降低肝损伤小鼠肝脏中过氧化脂质的含量显著提高其全血中超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽含量其它多种水果多糖如葡萄多糖番石榴多糖龙眼多糖荔枝多糖猕猴桃多糖石榴多糖香蕉多糖酸浆果多糖沙棘多糖等都表现出一定的体内外抗氧化和自由基清除活性此外中药多糖具有免疫增强和调节抗癌及许多重要的药理作用其抗氧化作用研究也取得了很大进展现代研究发现许多中药多糖都具有提高抗氧化酶活性清除自由基抑制脂质过氧化从而保护生物膜的作用关于其作用机理一般认为有以下四个方面加强的复制与合成提供必需的微量元素与营养来延长动物的生长期提高动物对非特异性刺激的抵抗能力以达到强壮作用通过调节和增强免疫功能达到抗衰老作用调节蛋白质和饮酸糖和脂质代谢抗脂质过氧化与抑制脂褐质形成作用提高机体比活力清除和抑制的活性作用以抗衰老孔明礼等研究半枝莲粗多糖体外清除自由基作用表明随着多糖浓度的升高其清除作用逐渐增强其他作用有些多糖还具有抗凝血抗突变润肤护肤抑菌作用等如抑菌作用通过葡萄多糖对种常见食品微生物进行抑菌实验结果表明葡萄多糖对枯草芽孢杆菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌根霉曲霉酿酒酵母有显著的抑制作用沙棘果皮叶中各多糖均可明显抑制大肠杆菌枯草杆菌和四叠菌的生长又如抗凝血作用有研究表明海藻多糖酸水解后得到的硫酸化脱氧半乳糖线性结构具有抗凝血作用肝素用于凝血性疾病的治疗和预防已有数十年它主要通过增强抗凝血酶肝素辅助因子的作用来抗凝血经过修饰的肝素具有抗肿瘤细胞黏附活性并明显失去其抗凝血活性消除了潜在出血的副作用可作为预防和治疗肿转移的候选药物王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺多糖提取方法的研究现状目前多糖提取方法有溶剂提取法酶提取法超声波辅助提取法微波辅助提取法超临界流体萃取法等溶剂提取法溶剂提取法是提取多糖的常用方法利用多糖不溶于乙醇的性质在提取液中加入乙醇使多糖沉淀出来常用的粗多糖提取方法有水提酸提和碱提目前提取多糖多采用热水浸提法因为酸提和碱法提取中极易破坏多糖的生物活性和立体结构且易引入杂质给后续工艺带来麻烦李艳红用传统热水法提取山楂多糖的最佳条件为温度提取时间液固比山楂多糖提取率有研究表明对于茶多糖的提取酶提法的提取率大于水提法但从生产成本和安全性考虑宜采用水提法超声波提取法超声提取是一种物理破碎过程利用超声破辐射产生的空化作用机械作用和热学作用超声提取可极大提高提取效率节约溶剂避免高温对提取物的影响微波提取法微波提取法是一种新型萃取技术利用高频电磁波穿透萃取介质细胞液吸收微波能细胞内温度迅速升高压力增大使细胞壁破裂有效成分被释放出来进入溶剂中从而被提取微波提取法选择性高萃取时间短提取效率高安全无污染但只适用对热稳定性的提取物酶提取法酶提取法是利用酶对细胞结构的破坏作用使存在于细胞内部的多糖释放出来从而提高了多糖的得率分部沉淀法常用的沉淀剂有甲醇乙醇和丙酮季胺盐沉淀法常用的季胺盐是十六烷基三甲基钱嗅化物及其碱和十六烷基吡啶实验时必须控制多糖混合液的小于及无硼砂存在柱层析纤维素柱层析常用不同浓度乙醇水溶液由高而低进行洗脱将各种多糖分离开来纤维素阴离子交换柱层析此法适用于分离各种酸性中性多糖和粘多糖用的交换剂为纤维素和纤维素凝胶柱层析常用的凝胶有葡聚糖凝胶琼脂糖凝胶及此法不适宜粘多糖的分离展开剂为各种浓度的盐溶液及缓冲液它们的离子强度最好不低于亲和层析用凝集素一般是蛋白质和糖蛋白作亲和色谱来分离多糖高压液相层析其他柱层析用活性碳及硅胶作载体的柱层来分离多糖或用硼砂型的离子交换树脂分离中性多糖多糖研究的发展趋势蚌埠学院毕业论文设计论文植物多糖生理活性构效关系的研究包括分子量大小对多糖生理活性的影响多糖空间构象对生理活动的影响等多糖的活性与其初级和高级结构特别是三维空间构象密切相关特别是高级结构对其影响更大加强植物多糖的分子修饰多糖分子修饰是通过化学物理学及生物学等手段对化合物分子进行结构构造以获得众多结构类型衍生物的方法分子多糖可通过改变植物多糖的空间结构相对分子量及取代基种类数目和位置而对多糖的生物活性产生影响利用生物技术推动多糖生物活性物质的开发尽管植物多糖中发现了众多具有抗肿瘤抗病毒抗氧化抗辐射等生物活性但很多野生植物在自然界中的生长量是有限的而这些化合物独特复杂的结构又使得化学合成技术难度大或不经济对这些化合物的深入的药理研究及进一步的临床研究举步维艰如果能够利用基因工程细胞工程等新技术来培育目标产物的高产新品种多糖的活性研究将大大加快发展速度石榴生物活性的研究现状和发展趋势石榴为石榴科石榴属植物别名安石榴甘石榴丹若沃丹冉若金婴金庞天浆若榴等石榴原产于伊朗阿富汗等中亚地区西汉时引入中国陕西至今己有多年栽培历史石榴是落叶灌木或小乔木小枝圆形或略带角状顶端刺状光滑无毛叶对生或簇生长倒卵形至长圆形或椭圆状披针形顶端尖表面光滑背面中脉凸起有短叶柄花至数朵生于枝顶或腋生有短柄花萼钟形桔红色质厚顶端裂裂片外面有乳头状突起花瓣与萼片同数互生生于萼筒内倒卵形稍高出花尊裂片通常红色也有白黄或深红色的花瓣皱缩因单瓣重瓣的不同而有几个变种花期月果期月果皮厚果皮内通常分为个子房室有极薄的膜彼此分隔每室内有多数籽粒种子种子的外中皮为肉质层即食用部分呈鲜红粉色淡红黄色或白色内含汁液现在我国南北各地除极寒地区外均有栽培分布中国药典规定石榴的果皮入药其功效为涩肠止泻止血驱虫用于治疗久泻久痢便血脱肛崩漏白带和虫积腹痛除了果皮以外石榴的其他部位也可作药用石榴的根皮可以除虫树皮可以抗菌石榴籽是藏族的习用药材可治疗食欲不振消化不良等胃肠道疾病石榴叶的水提取物和石榴果汁具有王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺较强的抗氧化和调血脂作用下面就以石榴的生物活性为例来介绍其研究现状和发展趋势抗氧化活性国外学者利用铁离子还原方法比较了石榴汁石榴皮及石榴籽提取物的抗氧化性能结果表明石榴皮提取物在清除及抑制超氧化离子氢氧基及过氧化氢离子和硫酸铜引起的低密度脂蛋白氧化方面的抗氧化性能远高于石榴汁和石榴籽提取物李云峰等采用高脂饲料喂养小鼠建立动物模型观察提取物对抗氧化功能血脂脏脂类含量以及主动脉壁形态学的影响结果发现石榴果皮提取物可以有效改善抗氧化功能降低血脂肝脏脂肪和胆固醇含量抑制主动脉粥样硬化早期病变石榴果皮提取物能够抑制早期病变可能与其提高抗氧化功能降低血脂有关宋薇薇等采用微波辅助法提取了石榴果皮多酚类化合物并研究了石榴果皮提取物对经自由基清除作用和小鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用结果表明国外学者比较了泰国石榴等种常见的果皮抗氧化活性结果显示石榴果皮的活性最高其清除自由基的值为试验的抗氧化力值值为等分别采用乙醛醋酸丙酮甲醇和水从干石榴皮中提取生物活性物质结果表明所得到的提取物都具有抗氧化和抗诱变生物活性抗菌活性石榴果皮在体外对志贺施氏福氏宋氏等种痢疾杆菌及伤寒杆菌结核杆菌大肠杆菌变形杆菌绿脓杆菌金黄色葡萄球菌脑膜炎双球菌等多种细菌均有抑制作用对金黄色葡萄球菌沙门氏杆菌大肠杆菌黑曲霉的平均抑菌浓度分别为对绿脓杆菌白色念珠菌的最低抑菌浓度是石榴果皮对堇氏毛癣菌同心性毛癣菌等多种皮肤真菌也有不同程度地抑制作用此外胡建军等用石榴果皮甘草侧柏叶等六种植物提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果进行了比较研究结果表明石榴果皮的抑菌效果最好胡伟等发现石榴皮对幽门螺杆菌有良好的抑菌效果并且甲硝唑耐药株及敏感株都对其敏感石榴皮的提取物可以有效的抑制大肠杆菌抗病毒活性蚌埠学院毕业论文设计论文张杰等研究表明石榴果皮水提液具有抗生殖器疱疹病毒同时证明石榴果皮中的鞣质是抗的有效成分此外石榴果皮水提液在体外对乙型肝炎病毒还有灭活作用剂量依赖性抑制病聚合酶的活性周春等实验结果证明石榴果皮可制成防止女性生殖器疱疹病毒感染的药物并可推荐临床应用鸡胚法实验证明石榴果皮剂稀释到万万仍有抑制流感病毒的作用抗肿瘤活性国外对大量植物研究发现鞣花酸具有强大的抗癌活性且主要集中在对石榴中鞣花酸的研究国外学者等发现石榴提取物有抑制前列腺癌的作用并证实几种石榴化学成分协同作用抑制前列腺癌的效果要优于鞣花酸以色列工程技术研究所的研究人员报道石榴皮有显著的抗乳腺癌特性观察正常的和肿瘤的乳腺细胞接触石榴皮提取物后发现石榴皮提取物中的多酚一种有效的抗氧化剂破坏了的非雌激素依赖性肿瘤细胞和的雌激素依赖性肿瘤细胞而绝大多数健康细胞并不受此影响这一研究对于乳腺癌治疗和雌激素替代疗法的安全性有重要的意义液态石榴皮萃取物可使人体淋巴瘤的和癌细胞群断片凋亡并抑制癌细胞的生长石榴皮萃取物作为碳酸酐酶抑制剂也将起到抗癌的作用有报道说芳香酶可诱导生殖系统癌症的发生石榴皮萃取物可以有效抑制芳香酶活性石榴皮萃取物还可有效地抑制人类子宫肌层成纤维细胞的增殖从石榴果皮中提取的逆没食子鞣质经纯化后对小鼠的药理试验表明在体内逆没食子鞣质被水解为鞣花酸鞣花酸以的剂量饲养小鼠时可的抑制由诱发的多种肿瘤据报道石榴果皮具有抑制癌症的活性能抑制肿瘤细胞增殖侵袭转移及血管形成国外学者测定了经石榴果皮多酚石榴汁多酚和石榴籽油混合物对前列腺癌细胞的侵袭能力结果表明石榴水果中这三种不同来源的混合物能够显著抑制前列腺癌细胞侵袭膜的活力并且降低了前列腺癌细胞的蔓延速度石榴提取物还具有抗乳腺癌的作用石榴汁果皮提取物和石榴籽油都可对乳腺癌细胞的增殖产生抑制作用三者在体外都可阻断内生活性雌激素的生物合成抑制芳香化酶的活性可起到对乳腺癌的化学预防和辅助治疗作用免疫调节活性王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺国外学者等用石榴皮的悬浮液喂兔子结果发现石榴皮悬浮液能加强白细胞移动抑制口服石榴皮的悬浮液能刺激兔子的细胞介导和体液成分免疫系统能引起抗体效价的极大增加高剂量石榴皮醇提物和螺旋藻对环磷酰胺引起的免疫力低下小鼠的抗体分泌细胞功能抗体值和血清溶血素均具有显著提高的作用证实石榴皮醇提物对环磷酰胺导致的免疫低下小鼠的体液免疫功能具有一定的提高作用发展趋势开展多糖资源的开发多糖结构的分析多糖药理作用等的研究具有极其重要的现实意义对石榴皮的研究目前着眼对石榴皮的研究目前主要着眼于皮中鞣质主要成分为石榴苷提取工艺条件及含量鞣花酸含量没食子酸含量石榴皮提取物的抗氧化作用石榴皮多酚提取物降血脂效果石榴皮提取物在酱油贮藏中的应用治疗慢性腹泻等方面的研究尚待研究的问题石榴多糖的应用前景广阔但对石榴多糖的研究却存在诸多困难如分离提纯程序复杂回收率较低而合成方法和作为先导化合物的衍生物合成研究也不如核酸和蛋白质研究的深入等从而相对制约了多糖的开发利用石榴皮中生物活性质可走生物制药的道路石榴中的酶需进行深度研究与开发本文主要以怀远石榴皮为原料以多糖得率为指标水浸法提取石榴皮多糖设计正交试验考察醇沉浓度料液比提取时间提取温度提取值提取次数等因素对石榴皮多糖提取率的影响确定最佳提取工艺提取的多糖用苯酚硫酸光度法测定含量材料与方法材料与试剂怀远石榴果皮购自蚌埠水果市场葡萄糖无水乙醇苯酚浓硫酸丙酮等为国产分析纯仪器与设备蚌埠学院毕业论文设计论文紫外可见光分光光度计上海尤尼柯仪器有限公司旋转蒸发仪上海亚荣生化仪器厂循环水式多用真空泵郑州长城科工贸有限公司高速粉碎机天津市泰斯特仪器有限公司台式低速离心机上海安亭科学仪器厂真空干燥箱上海一恒科技有限公司酸度计上海雷磁仪器厂数显恒温水浴锅江苏国华电器有限公司等试验方法工艺流程新鲜石榴皮手工剥皮洗干净烘干粉碎过目筛水浴提取过滤取滤液旋转蒸发浓缩无水乙醇沉淀低速离心取沉淀真空干燥粗多糖实验方法苯酚浓硫酸法测定多糖含量测定原理糖在浓硫酸作用下水解生成单糖并迅速脱水生成糖醛衍生物然后与苯酚缩合成橙黄色化合物且颜色稳定在波长处和一定的浓度范围内其吸光度与多糖含量呈线性关系正比从而可以利用分光度计测定其吸光度并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量标准曲线绘制精密量取标准贮备液分别置容量瓶中定容摇匀取稀释液各置具塞试管中加入苯酚溶液摇匀加入浓硫酸立即混匀室温放置沸水浴加热取出流水速冷至室温以空白溶液作参比参比调分别于处测吸光值以葡萄糖浓度作横坐标吸光值为纵坐标绘制标准曲线石榴皮多糖的测定精密吸取所得样品溶液置于具塞比色管中以下操作同标准曲线的步骤测定吸收度由回归方程计算出试液中葡萄糖含量计算样品中多糖的含量多糖得率石榴皮多糖得率多糖得率粗多糖质量原料质量粗多糖质量式中样品溶液中葡萄糖的浓度王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺样品溶液的稀释倍数倍换算因素葡萄糖换算为多糖国标单因素实验石榴皮多糖为水溶性多糖易溶与水影响热水浸提的因素主要有料液比乙醇浓度浸提时间浸提温度初始条件为料液比提取温度浸提时间提取次数次和醇沉浓度保持其他条件保持不变逐次改变其中的某一个因素通过实验确定该条件下的多糖得率以某一因素作横坐标多糖得率为纵坐标绘制曲线在该单因素试验中找出多糖产量与各因素间的关系确定主要影响因素为正交优化实验做准备正交实验采用正交试验设计确定石榴皮多糖的最佳提取工艺参数设计方案见表统计分析运用分析软件对正交实验数据进行方差分析结果与分析水浸处理单因素试验水提温度对石榴皮多糖提取效果的影响初始条件见设置温度梯度为条件下计算多糖得率由图可以看出随着提取温度的升高石榴皮多糖的得率也在提高温度在以下时增幅明显这一现象可能是由于温度升高使溶解度增大造成的当提取温度超过以后时石榴皮多糖得率仍在提高但增幅明显减小因此正交实验选择的三个温度水平为提取时间对石榴皮多糖提取效果的影响初始条件见设置提取时间分别为条件下计算多糖得率从图可知石榴皮多糖的得率随提取时间的延长而增加在以蚌埠学院毕业论文设计论文内增幅明显提取时间超出后增幅变小从生产角度考虑石榴皮多糖的提取时间以为宜因此正交实验选择的三个时间水平为图水提温度对多糖得率的影响水提时间对多糖得率的影响料液比对石榴皮多糖提取效果的影响初始条件见在料液比分别为条件下计算多糖得率从图可以看出石榴皮多糖的得率随料液比的增加而呈上升趋势料液比在以下时增幅较大料液比超出后增幅较小这种现象的产生是由于在相同溶解度状态下随着溶剂量的增加溶质的溶解量也增加但在此溶解度下多糖已基本全部溶解此时溶剂中溶质的量已基本恒定再增加溶剂的量也不会使溶剂中溶质的量增加因此正交实验选择的三个料液比水平为乙醇浓度对石榴皮多糖提取效果的影响初始条件见在乙醇浓度分别为计算多糖得率从图看出随着乙醇体积分数的增大石榴皮多糖得率增加当体积分数大于时其得率开始下降其原因主要是随着乙醇体积分数的增大一些溶于乙醇的物质与多糖在溶剂中竞争增强使得多糖得率下降因此正交实验选择的三个料液比水平为图料液比对多糖得率的影响乙醇浓度对多糖得率的影响王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺正交试验结果在上述水浸单因素试验基础上以水提温度提取时间料液比乙醇浓度为实验因素采用正交实验对石榴皮多糖的提取工艺条件进行优化正交试验因素水平见表结果见表表石榴皮多糖水浸提取的正交实验因素水平表水平因素水提温度提取时间料液比乙醇浓度表石榴皮多糖水浸提取的正交试验结果试验号因素多糖得率统计分析结果表方差分析方差来源离均差平方和自由度方差值显著水平误差蚌埠学院毕业论文设计论文表单因素统计量表均数标准误均数标准误均数标准误均数标准误运用分析软件并参照文献的对实验数据进行方差分析分析结果见表由表可以看出水提温度离均差平方和最大影响最为显著乙醇浓度的离均差平方和较大影响较为显著提取时间的离均差平方和较小对多糖得率影响较小料液比影响最小结合单因素统计量表表中的均数估计结果表明石榴皮多糖最优组合是即水提温度提取时间为料液比乙醇浓度在此条件下进行实验多糖得率为结论本实验研究了水浸法提取石榴皮多糖的工艺条件得出石榴皮多糖的最佳提取工艺条件为水提温度提取时间为料液比乙醇浓度按该工艺条件进行提取石榴皮多糖的得率为谢辞感谢柯春林老师对本文的指导和提出的宝贵建议特此致谢王岩正交法优化怀远石榴皮多糖提取工艺参考文献周建华胡建平石榴生物活性物质的研究进展中国酿造张惟杰糖复合物生化研究技术版杭州浙江大学出版社沈红霞周本宏正交设计优选石榴皮鞣质的提取工艺中国现代中药科技楠极李远志李婷等微波辅助提取番石榴叶中多酚物质的工艺研究食品工业张立华张元湖于军伟等超声波辅助提取石榴叶单宁的工艺农业工程学报刘姗正交法优选石榴皮中黄酮类化合物的提取工艺广州化工邓振伟于萍陈玲软件在正交试验设计结果分析中的应用电脑学习