基因工程知识点与习题

红星教育一对一专业辅导1专题基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望进行严格的设计通过体外重组和转基因技术赋予生物以新的遗传特性创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品基因工程是在分子水平上进行设计和施工的又叫做重组技术一基因工程的基本工具分子手术刀限制性核酸内切酶限制酶来源主要是从原核生物中分离纯化出来的功能能够识别双链分子的某种特定的核苷酸序列并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开因此具有专一性结果经限制酶切割产生的片段末端通常有两种形式黏性末端和平末端分子缝合针连接酶两种连接酶连接酶和连接酶的比较相同点都缝合磷酸二酯键区别连接酶来源于噬菌体只能将双链片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来而连接酶能缝合两种末端但连接平末端的之间的效率较低与聚合酶作用的异同聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端形成磷酸二酯键连接酶是连接两个片段的末端形成磷酸二酯键分子运输车载体载体具备的条件能在受体细胞中复制并稳定保存具有一至多个限制酶切点供外源片段插入具有标记基因供重组的鉴定和选择最常用的载体是质粒它是一种裸露的结构简单的独立于细菌染色体之外并具有自我复制能力的双链环状分子其它载体噬菌体的衍生物动植物病毒二基因工程的基本操作程序第一步目的基因的获取目的基因是指编码蛋白质的结构基因原核基因采取直接分离获得真核基因是人工合成人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法技术扩增目的基因原理双链复制过程第一步加热至解链第二步冷却到引物结合到互补链第三步加热至热稳定聚合酶从引物起始互补链的合成第二步基因表达载体的构建目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传至下一代使目的基因能够表达和发挥作用组成目的基因启动子终止子标记基因红星教育一对一专业辅导2启动子是一段有特殊结构的片段位于基因的首端是聚合酶识别和结合的部位能驱动基因转录出最终获得所需的蛋白质终止子也是一段有特殊结构的片段位于基因的尾端标记基因的作用是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因从而将含有目的基因的细胞筛选出来常用的标记基因是抗生素基因第三步将目的基因导入受体细胞转化的概念是目的基因进入受体细胞内并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程常用的转化方法将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法其次还有基因枪法和花粉管通道法等将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术此方法的受体细胞多是受精卵将目的基因导入微生物细胞原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快多为单细胞遗传物质相对较少最常用的原核细胞是大肠杆菌其转化方法是先用Ca2处理细胞使其成为感受态细胞再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子完成转化过程重组细胞导入受体细胞后筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达第四步目的基因的检测和表达首先要检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因方法是采用分子杂交技术其次还要检测目的基因是否转录出了方法是采用用标记的目的基因作探针与杂交最后检测目的基因是否翻译成蛋白质方法是从转基因生物中提取蛋白质用相应的抗体进行抗原抗体杂交有时还需进行个体生物学水平的鉴定如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状三基因工程的应用植物基因工程抗虫抗病抗逆转基因植物利用转基因改良植物的品质动物基因工程提高动物生长速度改善畜产品品质用转基因动物生产药物基因治疗把正常的外源基因导入病人体内使该基因表达产物发挥作用四蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质以满足人类的生产和生活的需求基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质转录翻译红星教育一对一专业辅导3专题细胞工程一植物细胞工程理论基础原理细胞全能性全能性表达的难易程度受精卵生殖细胞干细胞体细胞植物细胞动物细胞植物组织培养技术过程离体的植物器官组织或细胞愈伤组织试管苗植物体用途微型繁殖作物脱毒制造人工种子单倍体育种细胞产物的工厂化生产地位是培育转基因植物植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序植物体细胞杂交技术过程诱导融合的方法物理法包括离心振动电刺激等化学法一般是用聚乙二醇作为诱导剂意义克服了远缘杂交不亲和的障碍二动物细胞工程动物细胞培养概念动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织将它分散成单个细胞然后放在适宜的培养基中让这些细胞生长和繁殖动物细胞培养的流程取动物组织块动物胚胎或幼龄动物的器官或组织剪碎用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞制成细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养细胞贴壁和接触抑制悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上称为细胞贴壁细胞数目不断增多当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时细胞就会停止分裂增殖这种现象称为细胞的接触抑制动物细胞培养需要满足以下条件无菌无毒的环境培养液应进行无菌处理通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染此外应定期更换培养液防止代谢产物积累对细胞自身造成危害营养合成培养基成分糖氨基酸促生长因子无机盐微量元素等通常需加入血清血浆等天然成分温度适宜温度哺乳动物多是气体环境空气是细胞代谢所必需的的主要作用是维持培养液的红星教育一对一专业辅导4动物细胞培养技术的应用制备病毒疫苗制备单克隆抗体检测有毒物质培养医学研究的各种细胞动物体细胞核移植技术和克隆动物哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植比较容易和体细胞核移植比较难选用去核卵母细胞的原因卵母细胞比较大容易操作卵母细胞细胞质多营养丰富体细胞核移植的大致过程是右图核移植胚胎移植体细胞核移植技术的应用加速家畜遗传改良进程促进良畜群繁育保护濒危物种增大存活数量生产珍贵的医用蛋白作为异种移植的供体用于组织器官的移植等体细胞核移植技术存在的问题克隆动物存在着健康问题表现出遗传和生理缺陷等动物细胞融合动物细胞融合也称细胞杂交是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似常用的诱导因素有聚乙二醇灭活的病毒电刺激等动物细胞融合的意义克服了远缘杂交的不亲和性成为研究细胞遗传细胞免疫肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用法植物体细胞杂交细胞膜的流动性去除细胞壁后诱导原生质体融合离心电刺激振动聚乙二醇等试剂诱导克服了远缘杂交的不亲和性获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外再加灭活的病毒诱导制备单克隆抗体的技术之一红星教育一对一专业辅导5单克隆抗体抗体一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体从血清中分离出的抗体产量低纯度低特异性差单克隆抗体的制备过程杂交瘤细胞的特点既能大量繁殖又能产生专一的抗体单克隆抗体的优点特异性强灵敏度高并能大量制备单克隆抗体的作用作为诊断试剂准确识别各种抗原物质的细微差异并跟一定抗原发生特异性结合具有准确高效简易快速的优点用于治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗可制成生物导弹也有少量用于治疗其它疾病专题胚胎工程一动物胚胎发育的基本过程胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术如胚胎移植体外受精胚胎分割胚胎干细胞培养等技术经过处理后获得的胚胎还需移植到雌性动物体内生产后代以满足人类的各种需求动物胚胎发育的基本过程受精场所是母体的输卵管上段注入小鼠细胞融合分离抗原注入小鼠体内B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养选择培养细胞培养基体内培养体外培养从腹水提取从培养液提取单克隆抗体红星教育一对一专业辅导6卵裂期特点细胞有丝分裂细胞数量不断增加但胚胎的总体体积并不增加或略有减小桑椹胚特点胚胎细胞数目达到个左右时胚胎形成致密的细胞团形似桑椹是全能细胞囊胚特点细胞开始出现分化该时期细胞的全能性仍比较高聚集在胚胎一端个体较大的细胞称为内细胞团将来发育成胎儿的各种组织中间的空腔称为囊胚腔原肠胚特点有了三胚层的分化具有囊胚腔和原肠腔二胚胎干细胞哺乳动物的胚胎干细胞简称或细胞来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来具有胚胎细胞的特性在形态上表现为体积小细胞核大核仁明显在功能上具有发育的全能性可分化为成年动物体内任何一种组织细胞另外在体外培养的条件下可以增殖而不发生分化可进行冷冻保存也可进行遗传改造胚胎干细胞的主要用途是可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律是在体外条件下研究细胞分化的理想材料在培养液中加入分化诱导因子如牛黄酸等化学物质时就可以诱导细胞向不同类型的组织细胞分化这为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效的手段可以用于治疗人类的某些顽疾如帕金森综合症少年糖尿病等利用可以被诱导分化形成新的组织细胞的特性移植细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能随着组织工程技术的发展通过细胞体外诱导分化定向培育出人造组织器官用于器官移植解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题三胚胎工程的应用体外受精和胚胎的早期培养卵母细胞的采集和培养主要方法用促性腺激素处理使其排出更多的卵子然后从输卵管中冲取卵子直接与获能的精子在体外受精第二种方法从刚屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞第三种方法是借助超声波探测仪腹腔镜等直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞采集的卵母细胞都要在体外经人工培养成熟后才能与获能的精子受精精子的采集和获能在体外受精前要对精子进行获能处理受精获能的精子和培养成熟的卵细胞在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程胚胎的早期培养精子与卵子在体外受精后应将受精卵移入发育培养液中继续培养以检查受精状况和受精卵的发育能力培养液成分较复杂除一些无机盐和有机盐外还需添加维生素激素氨基酸核苷酸等营养成分以及血清等物质当胚胎发育到适宜的阶段时可将其取出向受红星教育一对一专业辅导7体移植或冷冻保存不同动物胚胎移植的时间不同牛羊一般要培育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植小鼠家兔等实验动物可在更早的阶段移植人的体外受精胚胎可在个细胞阶段移植胚胎移植胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或者通过体外受精及其它方式得到的胚胎移植到同种的生理状态相同的其它雌性动物的体内使之继续发育为新个体的技术其中提供胚胎的个体称为供体接受胚胎的个体称为受体供体为优良品种作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种地位如转基因核移植或体外受精等任何一项胚胎工程技术所生产的胚胎都必须经过胚胎移植技术才能获得后代是胚胎工程的最后一道工序胚胎移植的意义大大缩短了供体本身的繁殖周期充分发挥雌性优良个体的繁殖能力生理学基础动物发情排卵后同种动物的供受体生殖器官的生理变化是相同的这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境早期胚胎在一定时间内处于游离状态这就为胚胎的收集提供了可能受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应这为胚胎在受体的存活提供了可能供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响基本程序主要包括对供受体的选择和处理选择遗传特性和生产性能优秀的供体有健康的体质和正常繁殖能力的受体供体和受体是同一物种并用激素进行同期发情处理用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理配种或人工授精对胚胎的收集检查培养或保存配种或输精后第天用特制的冲卵装置把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来也叫冲卵对胚胎进行质量检查此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段直接向受体移植或放入的液氮中保存对胚胎进行移植移植后的检查对受体母牛进行是否妊娠的检查胚胎分割概念是指采用机械方法将早期胚胎切割等份等份等经移植获得同卵双胎或多胎的技术意义来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质属于无性繁殖材料发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚桑椹胚至囊胚的发育过程中细胞开始分化但其全能性仍很高也可用于胚胎分割操作过程对囊胚阶段的胚胎分割时要将内细胞团均等分割否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育红星教育一对一专业辅导8高考复习基因工程专题测试题2酶ABC是大肠杆菌的三种酶每种酶只能催化下列反应链中的一个步骤其中任意一种酶的缺失均能导致该菌因缺少化合物丁而不能在基本培养基上生长现有三种营养缺陷型突变体在添加不同化合物的基本培养基上的生长情况如下表由上可知酶ABC在该反应链中的作用顺序依次是A酶A酶B酶CB酶A酶C酶BC酶B酶C酶AD酶C酶B酶A3利用外源基因在受体细胞中表达可生产人类所需要的产品下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是A棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白4已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点如图中箭头所指如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断则会产生abcd四种不同长度的DNA片段现在多个上述线性DNA分子若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断则从理论上讲经该酶切后这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是A3B4C9D125现有一长度为1000碱基对bp的DNA分子用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子用EcoRIKpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子该DNA分子的酶切图谱正确的是9下列哪项不是转基因食物潜在的安全隐患A某些转基因生物可以合成干扰素进人人体可增强免疫力B转基因植物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原线性DNA分子的酶切示意图红星教育一对一专业辅导9C转基因植物有可能合成出对人体有直接毒性或潜在毒性的蛋白质D某些基因足以使植物体内某些代谢途径发生变化导致转基因农作物营养成分的改变10关于右图中DNA分子片段的说法不正确的是A把此DNA放在含15N的培养液中复制2代子代中含15N的DNA单链占总链的78B处的碱基对缺失导致基因突变C该DNA的特异性表现在碱基种类和ACTG的比例上D限制性内切酶作用于部位解旋酶作用于部位11质粒是基因工程最常用的运载体有关质粒的说法正确的是A质粒不仅存在于细菌中某些病毒也具有B细菌的基因只存在于质粒上C质粒为小型环状DNA分子存在于拟核外的细胞质基质中D质粒是基因工程中的重要工具酶之一12下列关于DNA连接酶的作用叙述正确的是A将单个核苷酸加到某DNA片段末端形成磷酸二酯键B将断开的两个DNA片段的骨架连接起来重新形成磷酸二酯键C连接两条DNA链上碱基之间的氢键D只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来而不能将双链DNA片段末端之间进行连接13下表是基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容正确的组合是14我国科学家运用基因工程技术将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达培育出了抗虫棉下列叙述不正确的是A基因非编码区对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少B重组DNA分子中增加一个碱基对不一定导致毒蛋白的毒性丧失C抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物从而造成基因污染D转基因棉花是否具有抗虫特性是通过DNA分子杂交技术来确定的供体分子手术刀分子缝合针载体受体A质粒限制性内切酶DNA连接酶提供目的基因的生物大肠杆菌等B提供目的基因的生物DNA连接酶限制性内切酶质粒大肠杆菌等C提供目的基因的生物限制性内切酶DNA连接酶质粒大肠杆菌等D大肠杆菌等DNA连接酶限制性内切酶提供目的基因的生物质粒红星教育一对一专业辅导1015下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造工程菌的示意图已知细菌B细胞内不含质粒A也不含质粒A上的基因判断下列说法正确的是A将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法B将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上能生长的只是导入了重组质粒的细菌C将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上能生长的就是导入了质粒A的细菌D目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长162008年诺贝尔化学奖授予了发现和发展了水母绿色荧光蛋白的三位科学家将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因再将该融合基因转入真核生物细胞内表达出的蛋白质就会带有绿色荧光绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是A追踪目的基因在细胞内的复制过程B追踪目的基因插入到染色体上的位置C追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布D追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构20基因工程中需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒便于重组和筛选已知限制酶的识别序列和切点是一GGATCC限制酶的识别序列和切点是GATC根据图示判断下列操作正确的是A目的基因和质粒均用限制酶切割B目的基因和质粒均用限制酶切割C质粒用限制酶切割目的基因用限制酶切割D质粒用限制酶切割目的基因用限制酶切割二非选择题22图为某种质粒表达载体简图小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRIBamHI的酶切位点ampR为青霉素抗性基因tctR为四环素抗性基因P为启动因子T为终止子ori为复制原点已知目的基因的两端分别有包括EcoRIBamHI在内的多种酶的酶切位点1将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切酶切产物用DNA连接酶进行连接后其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有红星教育一对一专业辅导11三种若要从这些连接产物中分离出重组质粒需要对这些连接产物进行2用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是若接种到含青霉素的培养基中能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是3目的基因表达时RNA聚合酶识别和结合的位点是其合成的产物是4在上述实验中为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接酶切时应选用的酶是23下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程的示意图请据图回答下列有关问题1科学家在进行图中操作时要用分别切割运载体和目的基因运载体的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过而结合2基因工程的理论基础是法则可用公式图解表示为3是导入目的基因的受体细胞经培养筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株经分析该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段因此可以把它看作是杂合子理论上在该转基因自交产生F1代中仍具有抗虫特性的植株占总数的将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后后代往往有很多植株不再具有抗虫特性原因是要想获得纯合子常采用的方法是4下列是几种搭配的密码子据此推断图中合成的多肽其前三个搭配的种类按前后顺序排列甲硫氨酸AUG甘氨酸GGA丝氨酸UCU酪氨酸UAC精氨酸AGA丙氨酸GCU24转基因抗病香蕉的培育过程如图所示质粒上有PstSmaEcoRApa等四种限制酶切割位点请回答红星教育一对一专业辅导121构建含抗病基因的表达载体A时应选用限制酶对进行切割2培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞应使基因表达载体A中含有作为标记基因3香蕉组织细胞具有因此可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株图中依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的25苏云金杆菌Bt能产生具有杀虫能力的毒素蛋白下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图为抗氨苄青霉素基因据图回答下列问题1将图中的DNA用HindIIIBamHI完全酶切后反应管中有种DNA片段2图中表示HindIII与BamI酶切DNA连接酶连接的过程此过程可获得种重组质粒如果换用BstI与BamHI酶切目的基因与质粒连接后可获得种重组质粒3目的基因插入质粒后不能影响质粒的4图中的Ti质粒调控合成的vir蛋白可以协助带有目的基因的TDNA导人植物细胞并防止植物细胞中对TDNA的降解5已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体使细胞膜穿孔肠细胞裂解昆虫死亡而该毒素蛋白对人类的风险相对较小原因是人类肠上皮细胞6生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种其目的是降低害虫种群中的基因频率的增长速率红星教育一对一专业辅导1327在培育转基因植物的研究中卡那霉素抗性基因kan常作为标记基因只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长下图为获得抗虫棉的技术流程请据图回答1A过程需要的酶有2B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是3C过程的培养基除含有必要营养物质琼脂和激素外还必须加入4如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测D过程应该用作为探针5科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律将转基因植株与杂交其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为11若该转基因植株自交则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占28继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展最近科学家培育出一种转基因小鼠其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中请回答1将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞常用方法是2进行基因转移时通常要将外源基因转入中原因是3通常采用技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组4在研制膀胱生物反应器时应使外源基因在小鼠的细胞中特异表达5为使外源基因在后代长期保持可将转基因小鼠体细胞的转入细胞中构成重组细胞使其发育成与供体具有相同性状的个体该技术称为侵染抗虫基因含kan质粒重组质粒土壤农杆菌含重组质粒土壤农杆菌A构建导入B培养选择转基因抗虫植株再生植株愈伤组织离体棉花叶片组织C诱导选择分化D检测红星教育一对一专业辅导14参考答案25DDCD916ACCBCDCC20D22答案1目的基因载体连接物载体45载体连接物目的基因45目的基因连接物分离纯化其他合理答案也给分2载体45载体连接物目的基因45载体连接物载体45载体连接物3启动子mRNA4EcoRI和BamHI只答一个酶不给分23答案1同一种限制性内切酶碱基互补配对原则2中心334发生性状分离连续自交4甲硫氨酸丙氨酸丝氨酸24答案1PstEcoR含抗病基因的DNA质粒2抗卡那霉素基因3全能性脱分化再分化25答案142213复制4DNA水解酶5表面无相应的特异性受体6抗性27答案1限制性内切酶和DNA连接酶2具有标记基因能在宿主细胞中复制并稳定保存3卡那霉素4放射性同位素或荧光分子标记的抗虫基因5非转基因植株3110028答案1显微注射2受精卵或早期胚胎受精卵或早期胚胎细胞具有全能性可使外源基因在相应组织细胞表达3DNA分子杂交核酸探针4膀胱上皮5细胞核去核的卵核移植或克隆