培养基质量控制

培养基质控标准操作规程 1 检验目的 对商品化的培养基进行质量检测，保证培养基的质量。 2 检验原理 培养基应该是无菌的，选择培养基会根据相应的细菌选择性生长，可以保证细菌所需要生长条件，菌落生长良好。 3 步骤 3.1 频率 每批次或货次的培养基都要进行质量检测，包括外观质量验收和性能质量验收。 3.2外观验收 培养基外观质量验收包括平板有无裂纹、培养皿有无裂纹、充碟是否均匀、溶血情况、污染情况、有无冷冻、过多气泡和斑点、色泽是否均匀。通过肉眼观察后记录。 3.3 性能质量控制 3.3.1培养基质控菌株的选择。参照 WST232-2002商业微生物培养基质量检测规程和厂家说明书。 3.3.2 质控菌株的准备参见《标准菌株使用标准操作规程》。 3.3.3培养基性能检测项目包括：无菌试验、生长试验（营养能力）、菌落生长形态、抑菌试验、 3.3.3.1无菌试验 不接种任何菌体选择适宜的培养条件进行培养。 3.3.3.2生长试验（营养能力） 用工作质控菌株配置菌悬液，通过比浊仪配到0.5麦氏单位作为基础菌悬液。基础菌悬液用生理盐水100倍稀释，接种0.01ml在待测平板上，使其浓度达到1-2×104CFU/碟。如果不能保证在特定培养基上形成单个菌落，则应10倍稀释接种物。 3.3.3.3抑制试验 基础菌悬液用生理盐水10倍稀释，接种0.01ml在待测平板上，使其浓度达到1-2×105CFU/碟。 3.3.3.4根据培养基的种类，选用适宜的温度和二氧化碳，培养18-24小时，同时用空白培养基做阴性对照。 3.3.4次日观察菌落生长情况是典型。 3.3.5每个批号或货次的培养基至少要抽查一块进行室内质控。 3.3.6结果判断 3.3.6.1无菌试验应该无任何微生物生长 3.3.6.2营养能力 质控菌在待测培养基上生长并形成典型的菌落形态，则认为培养基效果满意。某些情况下应该有适当的颜色或溶血。 3.3.6.3抑菌试验 对于选择性培养基，某些菌被抑制，而所需的细菌充分生长。 表1 培养基质量控制标准 培养基 培养条件 质控菌株 预期结果 典型菌落 厌氧羊血琼脂培养基 厌氧，35℃，18-24h 脆弱拟杆菌ATCC25285 生长 灰白表面光滑边缘整齐 产气荚膜梭菌ATCC13124 生长 灰白不透明双层溶血环 血琼脂平板 35℃，18-24h，5%CO2 肺炎链球菌ATCC49619 生长 甲型溶血 化脓链球菌ATCC19615 生长 乙型溶血 金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长 乙型溶血 奇异变形杆菌 生长 迁徙生长 麦康凯 35℃，18-24h 大肠埃希菌ATCC25922 生长 粉红色菌落 粪肠球菌ATCC29212 抑制>90% 　 MH 35℃，18-24h 大肠埃希菌ATCC25922 生长 复方新诺明24-32 金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长 复方新诺明24-32 营养琼脂 35℃，18-24h 大肠埃希菌ATCC25922 生长 　 金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长 　 科玛嘉念珠显色 35℃，18-24h 克柔念珠菌ATCC62