毕业论文设计题目学院学院专业学生姓名学号年级级指导教师教务处制表二年三月二十日复发性口腔溃疡口腔微生态的研究摘要相关的文献研究表明在慢性胃癌病患者口腔牙菌斑唾液中以及胃内能同事检测出幽门螺旋菌而伴有感染的复发性口腔溃疡患者的消化道疾病的发病率也明显上升提示口腔为重要的聚集地之一感染与发病之间可能存在一定的内在联系结合既往史的相关证候研究提示的脾胃湿热证为相关疾病发生过程中邪气最盛邪正交争最剧烈的阶段及感染率较高之观点初步提出临床反复发作的原因部分可能是缘于湿热粘滞及致病隐匿渐进和缠绵的特征以及感染脾胃受损云华失调湿热内藴熏蒸口舌可能是缠绵难愈的关键病机之一脾胃湿热感染与发病存在一定的内在联系口腔中感染的相关研究的真实情况有关脾胃湿热感染与发病关系的探讨应引起必要的重视论文主要内容研究背景目的和意义复发性口腔溃疡又称复发性口疮复发性阿弗他溃疡或复发性阿弗他口炎是专指一类原因不明具有周期性反复发作但又具自限性的局限性口腔粘膜溃疡性损伤该病是口腔粘膜病中最常见的溃疡类疾病患病率高达左右居口腔粘膜病首位复发性口腔溃疡发病时病变部疼痛剧烈对患者工作与生活造成重要影响临床尚无明确有效的治疗方法因此的病因及发病机制研究对进一步的临床治疗研究具有重要作用本病病因至今不清多方面的病因研究表明的发生发展可能与多种因素有关国内外文献已报道的病因方面的研究包括免疫学异常病毒细菌感染微量元素精神神经因素遗传因素影响及微循环障碍等但尚无确切定论正常人体的口腔肠道呼吸道泌尿生殖道等均定植一定数量的细菌它们与宿主在长期进化过程中形成了一个能独立进行物质能量交流的动态平衡的微生态系统定居于口腔中的菌群称为口腔正常菌群它与宿主呈共栖的关系他们彼此之间保持着动态平衡对宿主起着有益和有害的双重作用口腔中的细菌在正常情况下对宿主有多种有益的生理作用如抵抗外来致病菌产生多种营养物质促进免疫应答产生过氧化物歧化酶清除自由基及抗肿瘤等作用一旦微生态平衡遭到破坏发生菌群失调上述生理作用发生改变对宿主可能造成损伤有学者提出的发生发展可能与多因素相互作用有关多方面的病因研究表明的发生发展可能与多种因素有关口腔内环境与这些因素有着密切的关系那么的发生发展是否与口腔的微生态相关呢患者口腔微生态是否发生了变化又是哪些方面发生变化本研究将从口腔菌群变化及口腔菌群构成的角度探讨复发性口腔溃疡是否与口腔微生态变化有关为口腔溃疡的防治探索新的依据材料和方法一唾液菌群涂片观察收集临床唾液标本共例将其分为溃疡组愈合组及正常对照组三组溃疡组为临床确诊并处于溃疡期的例患者其中男性例女性例平均年龄岁愈合组为临床确诊并处于愈合期的例患者其中男性例女性例平均年龄岁对照组为无病史的位健康成年人其中男性例女性例平均年龄岁所有受试者均符合以下纳入标准所有受检查者取样前周内未服用任何抗生素铋剂抗酸剂及受体拮抗剂月内未服用类固醇药物或非类固醇类抗炎药如阿司匹林等无其他系统疾病无其他口腔黏膜病无中重度牙周病方法唾液标本直接涂片革兰氏染色在显微镜油镜下选取分布均匀的个视野分别计数各视野下细菌中革兰氏阳性球菌简称革兰氏阴性球菌简称革兰氏阳性杆菌简称革兰氏阴性杆菌简称所占的构成比然后求其均值分析了不同菌群间的比值及构成比的变化统计学分析用统计学软件对不同组别四类细菌的构成比及不同菌群间的比值采用单因素方差分析采用法进行两两比较以为差异有统计学意义二复发性口腔溃疡口腔唾液中链球菌韦荣氏菌及奈瑟氏菌的定量分析收集符合纳入标准的临床标本共例纳入标准参考第一章将其分为溃疡组愈合组及正常对照组三组溃疡组为临床确诊并处于溃疡期的例患者其中男性例女性例平均年龄岁愈合组为临床确诊并处于愈合期的例患者其中男性例女性例平均年龄岁对照组为无病史的位健康成年人其中男性例女性例平均年龄岁方法用引物设计软件设计三种常见口腔细菌链球菌韦荣氏菌及奈瑟氏菌基因扩增引物并验证其特异性采用改良法提取细菌标本通过实时荧光定量检测链球菌韦荣氏菌及奈瑟氏菌三种常见口腔细菌的含量统计学分析用统计学软件对不同组别三种细菌的含量采用单向方差分析采用法进行两两比较以为差异有统计学意义三基于细菌基因分析的复发性口腔溃疡口腔细菌构成差异分析分别收集符合纳入标准的唾液标本例纳入标准参考第一章将其分为溃疡组愈合组及正常对照组三组每组例溃疡组为临床确诊并处于溃疡期的患者愈合组为临床确诊并处于愈合期的患者对照组为无病史的健康成年人方法采用改良法提取细菌标本并且制备成混合标本用细菌通用引物扩增混合标本琼脂糖凝胶电泳用软件行凝胶图像分析选择回收纯化差异较明显的条带测定片段序列并在中比对分析差异条带的种属源性实验结果一唾液菌群涂片观察溃疡组愈合组及对照组构成比分别为及构成比分别为及构成比分别为及溃疡组愈合组及对照组及构成比差异无统计学意义溃疡组愈合组及对照组构成比分别为及三组间构成比差异具有显著性溃疡组构成比较愈合组及对照组分别下降了及个百分点溃疡组愈合组及对照组球菌构成比均在以上三组总球菌的构成比分别为及总杆菌的构成比分别为及溃疡组愈合组及对照组总球菌及总杆菌构成比差异均无统计学意义溃疡组愈合组及对照组比值分别为及比值分别为及比值分别为及比值分别为及三组间及差异均无统计学意义在三组间存在差异溃疡组愈合组及对照组构成比分别为构成比分别为构成比分别为构成比分别为构成比分别为构成比分别为构成比分别为构成比分别为三组间构成比差异均无统计学意义溃疡组愈合组及对照组比值分别为比值分别为三组间差异均无统计学意义二复发性口腔溃疡口腔唾液中链球菌韦荣氏菌及奈瑟氏菌的定量分析溃疡组链球菌及韦荣氏菌含量的对数值分别为和均显著低于对照组和链球菌及韦荣氏菌含量分别较对照组降低了和溃疡组与愈合组间链球菌及韦荣氏菌的含量的对数值差异均无统计学意义愈合组链球菌含量的对数值为显著低于对照组菌量较对照组降低愈合组与对照组间韦荣氏菌含量的对数值差异统计结果奈瑟氏菌含量的对数值在三组间的差异均无统计学意义三基于细菌基因分析的复发性口腔溃疡口腔细菌构成差异分析在区间于溃疡组愈合组及对照组均稳定识别出条碱基数分别为及左右的三条条带溃疡组愈合组及对照组三条条带灰度值的百分比有差异在溃疡组愈合组及对照组条带组成方面存在差异各组在不同位置均有条带缺失现象条带综合波形图也反映了溃疡组愈合组及对照组在条带含量构成方面存在差异选择回收纯化片段暂命名为号片段大小约为测序结果通过生物信息学分析号比对结果示号差异条带与中同源匹配率结论溃疡组愈合组及对照组唾液菌群以球菌为主溃疡组革兰氏阴性球菌构成比减少表明复发性口腔溃疡唾液菌群构成发生了变化复发性口腔溃疡患者唾液中链球菌韦荣氏菌含量发生了减少性变化提示构成口腔微生态的重要球菌菌群链球菌和韦荣氏菌含量的改变与复发性口腔溃疡的发生发展有关细菌基因扩增琼脂糖电泳及图像分析结果表明复发性口腔溃疡患者口腔细菌构成与健康成人的口腔细菌构成存在差异概言之复发性口腔溃疡患者口腔菌群构成比及含量均发生了变化提示复发性口腔溃疡的发生发展与口腔微生态的变化有关临床上对复发性口腔溃疡的治疗应注意口腔微生态的调整和改善论文提纲中文摘要前言第一章唾液标本菌群涂片观察前言材料和方法结果讨论参考文献第二章复发性口腔溃疡口腔唾液中链球菌韦荣氏菌及奈瑟氏菌的定量分析前言材料与方法结果讨论参考文献第三章基于细菌基因分析的复发性口腔溃疡口腔细菌构成差异分析前言材料与方法结果讨论参考文献全文小结统计合格证明