高考生物复习微专题44 多聚酶链式反应 PCR.doc

118高考生物复习微专题44多聚酶链式反应PCR一单选题12021湖北某实验利用PCR技术获取目的基因实验结果显示除目的基因条带引物与模板完全配对外还有2条非特异条带引物和模板不完全配对为了减少反应非特异条带的产生以下措施中有效的是A增加模板DNA的量B延长热变性的时间C延长延伸的时间D提高复性的温度22021山东我国考古学家利用现代人的DNA序列设计并合成了一种类似磁铁的引子成功将极其微量的古人类DNA从提取自土壤沉积物中的多种生物的DNA中识别并分离出来用于研究人类起源及进化下列说法正确的是A引子的彻底水解产物有两种B设计引子的DNA序列信息只能来自核DNAC设计引子前不需要知道古人类的DNA序列D土壤沉积物中的古人类双链DNA可直接与引子结合从而被识别32021高三上普宁月考下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是A试管苗试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状B欲得到多个相同目的基因可采用PCR技术C同一植株的体细胞融合后形成的新个体与原植物可能属于不同物种D动物细胞培养过程中CO2的主要作用是维持培养液的pH42021如皋模拟PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术与人体细胞内DNA分子复制相比下列有关叙述错误的是A都遵循碱基互补配对原则BDNA聚合酶作用的最适温度不同C都是边解旋边复制的过程D复制方式都是半保留复制52021高二下阳江期末PCR是一种体外扩增DNA的技术模拟了体内的DNA复制过程下图是PCR技术原理示意图下列相关叙述错误的是A物质a是游离的4种脱氧核苷酸218B过程中94高温的作用相当于解旋酶的作用C新合成的子代DNA会恢复双螺旋结构D过程体现了DNA边解旋边复制的特点62021高二下韩城期末利用PCR技术扩增目的基因其原理与细胞内DNA复制类似如图所示图中引物为单链DNA片段它是子链合成延伸的基础以下叙述错误的是A变性过程中断裂的是DNA分子中碱基对之间的氢键B退火时引物A必须与引物B碱基互补配对C为保证pH的稳定PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行D通过PCR合成的子代DNA分子中只含有引物A或引物B72021高二下山东期末在表达融合蛋白时可以利用融合PCR技术把两个不同的基因片段连接起来其原理如图所示下列分析正确的是A该过程使用的引物P2和P3的碱基完全互补配对所以不能放在一个系统中工作318B融合PCR的第一步需要加入耐高温DNA聚合酶DNA连接酶等C融合PCR的第一步是不需要引物的可能是因为两条链重叠的部位互为另一条链的引物D若融合PCR的第二步获得了64个融合基因则该过程消耗了128个引物82021和平模拟实时荧光RTPCR可用于RNA病毒的核酸检测其原理是在PCR复性过程中探针和引物一起与模板结合探针两侧分别带有荧光基团和抑制荧光发出的淬灭基团新链延伸过程中DNA聚合酶会破坏探针导致荧光基团与淬灭基团分离而发出荧光利用RTPCR进行核酸检测的相关过程如图所示下列说法错误的是A若检测结果有强烈荧光信号发出说明被检测者没有感染病毒B做RTPCR之前需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针C需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增D病毒的检测还可以检测病毒引发产生的抗体其原理是抗原抗体杂交92021高二下山东月考通过设计引物运用PCR技术可以实现目的基因的定点诱变下图为基因工程中获取突变基因的过程其中引物1序列中含有一个碱基T不能与目的基因片段配对但不影响引物与模板链的整体配对反应体系中引物1和引物2的5端分别设计增加限制酶a和限制酶b的识别位点有关叙述正确的是A在PCR反应体系中还需要加入4种游离核苷酸解旋酶Taq酶等418B第2轮PCR引物1能与图中结合并且形成两条链等长的突变基因C引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入运载体D第3轮PCR结束后含突变碱基对且两条链等长的DNA占12102021高二下湖北月考X基因是DNA分子上一个有遗传效应的片段若要用PCR技术特异性地拷贝X基因需在PCR反应中加入两种引物两种引物及其与模板链的结合位置如图甲所示经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子如图乙所示其中第和种DNA分子的个数有A8个B6个C4个D2个112021高二下湖北月考PCR技术多聚酶链式反应是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术下图表示合成过程下列说法错误的是Aa过程高温使DNA变性解旋该过程不需要解旋酶的作用Bc过程要用到的酶在高温下失活因此在PCR扩增时需要再添加C如果把模板DNA的两条链用15N标记游离的脱氧核苷酸不标记控制945572温度循环3次则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25DPCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变122021高二下湖北月考PCR反应过程中引物的作用是A打开DNA双链便于复制进行B提供3端羟基作为DNA合成的起点C催化合成DNA子链以形成新的双螺旋518D提供5端羟基作为DNA合成的起点二实验探究题132021高三上韬智杯月考去年年初国内牛奶制品因为牧草进口成本上涨而涨价的现象引起了人们的关注紫花苜蓿是一种重要的牧草某研究团队拟将耐盐基因HLAl导入紫花苜蓿中培育耐盐牧草具体实验流程如图甲图乙是载体pCHLAl中TDNA示意图回答下列问题1过程为是基因工程的核心步骤此过程需要使用的酶有2过程常用的转化方法是农杆菌转化法转化是3已知Basta是一种除草剂则为达到培养并筛选的目的过程的培养基所含的成分必须含无机营养有机营养4过程得到的幼苗填一定或一定不或不一定含有HLAl基因为进一步确认可用PCR扩增的方法进行鉴定进行PCR反应所用到的引物应根据设计5要检测目的基因是否插入到苜蓿细胞的染色体DNA上可采用技术6判断本实验的目的基因是否表达成功还应进行实验142021高三上南京月考构筑新冠病毒防线需要两种措施一种是新冠病毒的检测以阻断传播途径另一种是新冠疫苗的研制以增强人体免疫力新冠病毒的S蛋白刺突蛋白是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白可与宿主细胞的病毒受体结合1新冠病毒的检测检测方法有核酸检测和免疫学检测核酸检测是新冠病毒感染的确诊依据目前采用RTPCR技术逆转录荧光PCR技术其原理是在PCR反应体系中加入引物的同时加入与某条模板链互补的荧光探针当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针使荧光监测系统接受到荧光信号即每扩增一次就有一个荧光分子生成如右图PCR每个循环包括3个阶段从理论上推测PCR扩增目的基因至第四轮循环产物中含有引物1的DNA片段所占的比例为618中国疾控中心公布了针对新冠病毒核酸不同序列设计的引物其中针对S蛋白基因的一段引物1为GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT能否依据此序列设计出另一段引物2的序列如果待测样本中没有检测出荧光初步推测样本中新冠病毒免疫学检测是以S蛋白作为抗原制备单克隆抗体生产快速检测新冠病毒的试剂盒具体步骤为将减毒新冠病毒多次注射到小鼠体内取其脾脏的细胞与骨髓瘤细胞加入天然成分共同培养再加入使其融合最后经过筛选和克隆化培养得到单克隆抗体为克服鼠源性单抗用于治疗时的异源性反应科研人员通过人工改造鼠源性单抗获得了嵌合抗体分析下图你认为最符合临床要求的嵌合抗体是AD中的2新冠疫苗的研制研制有以下几条研究技术路线技术路线腺病毒载体疫苗注入人体后可表达出新冠病毒的诱发人体内产生抗新冠病毒的抗体和记忆细胞当人体被新冠病毒感染时记忆细胞能迅速增殖分化发挥免疫保护作用718与技术路线制备的DNA疫苗相比技术路线制备的mRNA疫苗安全性更目前接种新冠疫苗时采用的方法是三综合题152021高三上渑池月考编码蛋白甲的DNA序列序列甲由ABCDE五个片段组成编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成如图1所示回答下列问题1现要通过基因工程的方法获得蛋白乙若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列TTCGCTTCTCAGGAAGGA则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙原因是2某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶引物等还加入了序列甲作为加入了作为合成DNA的原料3现通过基因工程方法获得了甲乙丙三种蛋白要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用某同学做了如下实验将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组其中三组分别加入等量的蛋白甲乙丙另一组作为对照培养并定期检测T淋巴细胞浓度结果如图2由图2可知当细胞浓度达到a时添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加此时若要使T淋巴细胞继续增殖可采用的方法是细胞培养过程中培养箱中通常要维持一定的CO2浓度CO2的作用是仅根据图1图2可知上述甲乙丙三种蛋白中若缺少填ABCD或E片段所编码的肽段则会降低其剌激T淋巴细胞增殖效果818答案解析部分1答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答PCR过程中非特异性产物增加的原因是复性温度过低会造成引物与模板的结合位点增加故可通过提高复性的温度来减少反应非特异性条带的产生D正确ABC错误故答案为D分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A引子是DNA序列彻底水解产物为磷酸脱氧核糖和四种碱基共6种产物A错误B真核生物DNA主要存在细胞核中线粒体和叶绿体中也有B错误C引子是根据现代人DNA序列设计并合成C正确D双链DNA分子解旋为单链才能与引子结合D错误故答案为C分析1PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2分析题意可知引子是一段单链DNA序列根据碱基互补配对的原则去探测古人类DNA中与该序列配对的碱基序列9183答案A知识点PCR技术的基本操作和应用植物体细胞杂交的过程及应用动物细胞培养技术解析解答A试管牛是体外受精获得属于无性生殖A错误BPCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术B正确C将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞杂种细胞培育成杂种植株不同种的植物之间具有生殖隔离不属于同一物种C正确D动物细胞培养过程中CO2的作用是维持培养液的pHD正确故答案为A分析1PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2动物细胞培养条件1无菌无毒的环境消毒灭菌添加一定量的抗生素定期更换培养液以清除代谢废物2营养物质糖氨基酸促生长因子无机盐微量元素等还需加入血清血浆等天然物质3温度和pH4气体环境95空气细胞代谢必需的和5的CO2维持培养液的pH3植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性进行植物体细胞杂交时先用酶解法去除植物细胞的细胞壁进行植物原生质体的融合形成杂种细胞再通过植物的组织培养将杂种细胞培育成杂种植株不同种的植物之间具有生殖隔离该种方法打破了不同种植物间的生殖隔离克服了远缘杂交不亲和的障碍4答案C知识点PCR技术的基本操作和应用DNA分子的复制解析解答ADNA分子的体外复制和体内复制都遵循碱基互补配对原则A正确BPCR技术是在较高温度条件下进行的因此PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高B正确CPCR技术是在较高温度条件下打开双链后进行扩增的不是边解旋边复制的C错误1018DDNA复制方式都是半保留复制D正确故答案为C分析1有关DNA分子的复制1场所主要在细胞核此外在线粒体和叶绿体中也能进行2时期有丝分裂间期和减数第一次分裂间期3特点边解旋边复制复制方式为半保留复制4条件模板亲代DNA分子的两条链原料游离的4种脱氧核苷酸能量ATP酶解旋酶DNA聚合酶4原则碱基互补配对原则ATGCCGTA2PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开5答案D知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A分析题图可知物质a是原料即游离的四种脱氧核苷酸A正确B根据PCR的反应原理可知高温使DNA变性氢键可自动解开解旋酶作用于氢键因此过程中94高温的作用相当于解旋酶的作用B正确C由题图中温延伸合成子链过程可知新合成的子代DNA恢复双螺旋结构C正确D过程DNA分子氢键全部打开过程以其中每一条DNA链为模板合成子链因此无法体现DNA边解旋边复制的特点D错误故答案为D分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开6答案B知识点PCR技术的基本操作和应用1118解析解答A在PCR技术变性过程中高温破坏的是DNA分子的双螺旋结构使其碱基对间的氢键断裂A正确B退火时引物A引物B需要与模板进行碱基互补配对B错误C为保证pH的稳定PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行并且要严格控制温度等条件C正确D由于DNA复制为半保留复制而引物为单链DNA片段所以由原来的母链为模板合成的两个新DNA分子中只含有引物A或引物BD正确故答案为B分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开7答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A该过程使用的引物P1和引物P2与基因甲的两端碱基序列进行碱基互补配对引物P3和引物P4与基因乙的两端碱基序列进行碱基互补配对引物P2和P3的碱基不会完全互补配对A错误B分析图可知融合PCR的第一步是让两个DNA分子进行碱基互补配对不需要加入耐高温DNA聚合酶DNA连接酶等B错误C融合PCR的第一步是不需要引物的因为两条链重叠的部位互为另一条链的引物C正确D若融合PCR的第二步获得了64个融合基因引物数目和新合成的子链数目相同即该过程消耗了6422126个引物D错误故答案为C分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物12184条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开8答案A知识点PCR技术的基本操作和应用基因工程的操作程序详细解析解答A若检测结果有强烈荧光信号发出说明被检测者体内有该病毒RNA即被检测者感染病毒A错误BPCR需要根据目的基因的核苷酸序列合成引物同时RTPCR还需要探针与待测样本DNA混合B正确CPCR扩增必须以DNA为模板RNA不能作为PCR扩增的模板所以需要将样本中的RNA反转录为DNA后再进行扩增C正确DRNA病毒的检测还可以通过特异性抗体检测即检测感染者体内通过免疫反应所产生的某种抗体原理是抗原抗体杂交D正确故答案为A分析1PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开2分子检测检测DNA45DNA分子杂交技术检测mRNA45分子杂交技术检测蛋白质抗原抗体杂交技术9答案C知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答A在PCR反应体系中还需要加入4种游离脱氧核苷酸Taq酶等但不需要加入解旋酶A错误B第2轮PCR引物1能与图中结合并且形成两条链不等长的突变基因较长B错误C引物中设计两种限制酶识别位点可以配合载体的限制酶识别位点帮助目的基因定向定点插入1318运载体避免发生自身环化C正确D在第3轮PCR结束后含突变碱基对且两条链等长的DNA有2个总DNA分子共8个所以比例为14D错误故答案为C分析PCR的原理是DNA双链复制步骤包括高温变性复性延伸该过程需要耐高温的DNA聚合酶催化需要四种游离的脱氧核苷酸做原料根据图中可得由于引物的一个碱基在不影响与模板链整体配对的前提下不与目的基因配对再利用PCR技术实现了目的基因的定点诱变其技术原理是碱基互补配对原则10答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答通过图中信息可知X基因第1次复制得到两个DNA和各1个X基因第2次复制得到4个DNA复制得和复制得和X基因第3次复制得到8个DNA复制得和复制得和复制得和复制得和X基因第4次复制得到16个DNA复制得和复制得和2个复制得2个和2个2个复制得2个和2个两个复制得到4个从上面的推测可知经4轮循环产物后产物中有8个3个3个1个1个因此经4轮循环后第和种DNA分子的个数有336个故答案为B分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提条件要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开11答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答APCR中解旋是通过高温进行的故a过程高温使DNA变性解旋该过程不需要解旋酶的作用A正确Bc过程用到的酶为耐高温的DNA聚合酶在高温下不会失活因此在PCR扩增时不需要再添加B错误1418C如果把模板DNA的两条链用15N标记游离的脱氧核苷酸不做标记循环3次后形成的DNA分子为8个而含有15N标记的DNA分子为2个故在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25C正确DPCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变D正确故答案为B分析PCR扩增技术中文名称为聚合酶链式反应关于PCR技术扩增目的基因简介1原理DNA双链可以进行半保留复制2过程第一步加热至9095DNA解链第二步冷却到5560引物结合到互补DNA链第三步加热至7075热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成3条件模板引物热稳定DNA聚合酶taqDNA聚合酶4特点使微量的DNA大幅增多12答案B知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答PCR技术的原理是DNA复制而DNA的复制需要引物其主要原因是DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链因此引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3端开始复制即B正确ACD错误故答案为B分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提条件要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开13答案1基因表达载体的构建限制性核酸内切酶或限制酶和DNA连接酶2目的基因进入受体细胞内并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程3植物激素Basta4不一定HLAl基因序列5DNA分子杂交6耐盐检测或鉴定1518知识点PCR技术的基本操作和应用基因工程的操作程序详细解析解答图甲中为目的基因的获取为基因表达载体的构建为将基因表达载体导入受体细胞为组织培养过程1过程将目的基因与农杆菌T1质粒重组在一起为基因表达载体的构建是基因工程的核心此过程需要限制酶和DNA连接酶2将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法转化是指目的基因进入受体细胞内并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程3据图乙可知TDNA中含有除草剂抗性基因则为达到培养并筛选的目的过程为植物组织培养过程培养基中应含有植物激素以调控组织培养进程也应含有除草剂Basta来筛选含有目的基因的受体细胞4由于导入的效率不会是100过程得到的幼苗不一定含有HLAl基因为进一步确认可用PCR扩增的方法进行鉴定引物要能与目的基因两条单链的碱基互补故进行PCR反应的两种引物应根据HLAl的基因序列设计5检测目的基因是否插入到苜蓿细胞的染色体DNA上可用放射性同位素标记的目的基因单链做探针采用DNA分子杂交技术若出现杂交带说明目的基因已插入到苜蓿细胞的染色体DNA上6培育耐盐牧草最终应进行个体水平的检测应进行耐盐检测或鉴定实验分析1基因表达载体的构建1过程用同一种限制酶切割目的基因和运载体再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子2目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用3基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因启动子在基因的首段它是RNA聚合酶的结合位点能控制着转录的开始终止子在基因的尾端它控制着转录的结束标记基因便于目的基因的鉴定和筛选21将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法基因枪法和花粉管通道法2将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法3将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法Ca2处理法3PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚台酶Taq酶5过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩増中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开16184目的基因的检测与鉴定分子水平上的检测检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因45DNA分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA45分子杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质45抗原抗体杂交技术个体水平上的鉴定抗虫鉴定抗病鉴定活性鉴定等14答案1变性退火引物和模板结合延伸1516不能不含有已免疫的B血清血浆PEG或聚乙二醇或灭活的病毒PEG或聚乙二醇或灭活的病毒2S蛋白高肌肉注射知识点PCR技术的基本操作和应用解析解答RTPCR技术逆转录荧光PCR技术PCR每个循环包括变性退火引物和模板结合延伸三个阶段用公式2n12n计算n为循环数第四循环产物中含有引物1的DNA片段所占比例是241241516针对S蛋白基因的一段引物1为GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT不能依据此序列设计出另一段引物2的序列因为两段引物的碱基序列没有相关性既不相同也不互补如果待测样本中没有检测出荧光初步推测样本中没有新冠病毒免疫学检测得到具体步骤为将减毒新冠病毒多次注射到小鼠体内取其脾脏的已经免疫过的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞加入血浆天然成分共同培养再加入PEG或聚乙二醇或灭活的病毒使其融合最后经过筛选和克隆化培养得到单克隆抗体为克服鼠源性单抗用于治疗时的异源性反应科研人员通过人工改造鼠源性单抗获得了嵌合抗体鼠抗体的免疫反应是由于抗体结构的恒定区导致的因此为了避免鼠抗体的异源性反应需要对该区域进行改造因此符合临床要求的嵌合抗体是D腺病毒载体疫苗上有编码新冠病毒S蛋白的基因注入人体后可表达出新冠病毒的S蛋白诱发人体内产生记忆细胞当人体被新冠病毒感染时能迅速增殖分化成相应的效应细胞发挥免疫保护作用技术路线制备的mRNA疫苗注射到人体内的是mRNA技术路线制备的DNA疫苗直射到人体内的是重组质粒重组质粒上面有S蛋白基因危险性相对高些目前接种新冠疫苗采用肌肉注射的方式接种分析PCR技术1概念PCR全称为聚合酶链式反应是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术2原理DNA复制3前提条件要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物4条件模板DNA四种脱氧核苷酸一对引物热稳定DNA聚合酶Taq酶17185过程高温变性DNA解旋过程低温复性引物结合到互补链DNA上中温延伸合成子链PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶高温条件下氢键可自动解开DNA复制时子链总是从5向3方向延伸子链与模板链反向平行引物所起的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3端开始连接脱氧核苷酸15答案1因为在启动子的下游接上的编码蛋白乙的DNA序列不能启动2模板DNA四种脱氧核苷酸3细胞培养维持培养箱中的pHC知识点PCR技术的基本操作和应用基因工程的应用动物细胞培养技术解析解答1题干信息基因序列TTCG结合转录过程中的碱基配对原则可知其转录出的mRNA上没有起始密码子AUG因为在启动子的下游接上的编码蛋白乙的DNA序列不能启动2PCR需要的条件包括引物耐高温的DNA聚合酶模板四种脱氧核糖核苷酸3动物细胞培养中细胞具有贴壁生长以及接触抑制的特点因此若要使T淋巴细胞继续增殖在培养中需要用胰蛋白酶处理贴壁的细胞并进行分瓶培养分瓶后的培养称为传代培养动物细胞培养过程中加入CO2作用是维持培养液的pH据图分析丙与对照接近甲和乙都有较大影响在甲乙中存在但在丙中不存在的片段是C所以缺少C片段会降低效果分析基因工程技术的基本步骤1目的基因的获取方法有从基因文库中获取利用PCR技术扩增和人工合成其中人工合成中方法中包括反转录法即可先提取人体细胞中的mRNA以其作为模板在逆转录酶的作用下合成cDNA或DNA2基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤基因表达载体包括目的基因启动子终止子和标记基因等3将目的基因导入受体细胞根据受体细胞不同导入的方法也不一样将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法基因枪法和花粉管通道法将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法4目的基因的检测与鉴定分子水平上的检测检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因45DNA分子杂交技术方法是采用DNA分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA45分子杂交技术方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交检测目的基因是否翻译1818成蛋白质45抗原抗体杂交技术个体水平上的鉴定抗虫鉴定抗病鉴定活性鉴定等